【求助】两个引物的Tm值相差太大

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标题:【求助】两个引物的Tm值相差太大

fox_79[使用道具]
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发表于 2015-4-28 09:54 资料个人空间短消息加为好友

小中大

各位大侠，本人做pcr，两个引物Tm值相差甚大，一个66°，一个59.7°，PCR结果一直出不来，请教各位应如何解决这一问题？多谢指点！

yizhi[使用道具]
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发表于 2015-4-28 09:55 资料个人空间短消息加为好友

小中大

引物一开始设计就出问题了，两个引物TM应该相差不要超过2度，你这可以试一试拿59度那个引物降低2-5度扩增

fox_79[使用道具]
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发表于 2015-4-28 09:55 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 yizhi 于 2015-4-28 09:55 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
引物一开始设计就出问题了，两个引物TM应该相差不要超过2度，你这可以试一试拿59度那个引物降低2-5度扩增

试过了，普通PCR时P不出来的！

yizhi[使用道具]
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发表于 2015-4-28 09:55 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 fox_79 于 2015-4-28 09:55 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

试过了，普通PCR时P不出来的！

那试试梯度，上下差十度吧

131415[使用道具]
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发表于 2015-4-28 09:56 资料个人空间短消息加为好友

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