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标题:【讨论帖】第一次做RCR的结果

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发表于 2015-4-30 11:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【讨论帖】第一次做RCR的结果


  
这样的结果 怎么有3条带呢？


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2015-4-30 11:27
2011-12-07 ht29 gapdh.jpg (14.03 KB)
 
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dog002[使用道具]
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发表于 2015-4-30 11:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

楼主的目的带、模板大小……？
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vvmmoy[使用道具]
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发表于 2015-4-30 11:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

目的条带不说清楚，没法分析
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HP007[使用道具]
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发表于 2015-4-30 11:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 vvmmoy 于 2015-4-30 11:28 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

目的条带不说清楚，没法分析

做的是GAPDH， 目的条带是第一条。初次做PCR不知道怎么能描述和分析的清楚 请见谅哈 谢谢了
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发表于 2015-4-30 11:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
需要知道marker的型号，可以通过marker相对应的地方知道扩增出来的片段大概有多长。

还知道你想要得到的片段大约有多大。

总的来说，楼主的PCR做的不错。
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发表于 2015-4-30 11:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不错啊，毕竟第一次。
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发表于 2015-4-30 11:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果结果应该是一条，在引物没问题的情况下就是退货温度过高
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发表于 2015-4-30 11:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 xue258 于 2015-4-30 11:31 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
需要知道marker的型号，可以通过marker相对应的地方知道扩增出来的片段大概有多长。

还知道你想要得到的片段大约有多大。

总的来说，楼主的PCR做的不错。 ...

用的是100bp labo dna ladder, 扩增的片段大概600bp 目的片段是从上往下数的第一条 （600bp左右）
谢谢！
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HP007[使用道具]
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发表于 2015-4-30 11:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 dior 于 2015-4-30 11:34 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

如果结果应该是一条，在引物没问题的情况下就是退货温度过高

恩，我也觉得该是第一条。 退火温度用的58°  引物如果有问题的话 会怎么样呢? 和这个一样 会有多的条带出现？
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dog002[使用道具]
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发表于 2015-4-30 11:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
做的是GAPDH， 目的条带是第一条。初次做PCR不知道怎么能描述和分析的清楚 请见谅哈 谢谢了

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理论上说提高退火温度可以减少杂带，如果引物是检测用的话可以摸索一下，如果是P一段序列做表达的话可以直接回收就行。
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