【讨论帖】微生物细菌细胞相关问题征集 - 经验共享

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标题:【讨论帖】微生物细菌细胞相关问题征集

okhaha[使用道具]
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发表于 2015-5-3 18:00 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 qqq111 于 2015-5-3 17:53 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

细胞消化胰酶的最适浓度是多少？用在生物反应器的浓度是一样的吗？

首先，我个人的理解，当然不是越高越好的。消化胰酶对细胞的损害也是很大的。
另外，我去帮你开贴讨论。谢谢支持！
微生物提问帖002
cuturl('http://www.ouryao.com/forum.php?mod=viewthread&tid=179647&fromuid=38958')

我百度了一下，得到这样一个答案……
因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++， Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下，pH 8.0，温度37℃其作用能力最强。另外，钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前，一定要用D-Hank's液或PBS液反复冲洗细胞培养瓶，以便于将含血清的培养基冲洗干净，这样就能大大提高消化液的消化能力。本中心通常使用的消化液浓度为：（1）0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA。（2）0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA。（3）0.25%胰蛋白酶。溶液pH8.0～9.0，使用D-Hank's液配制。多数细胞传代消化可使用0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA这种消化液。

S6044[使用道具]
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发表于 2015-5-3 18:00 资料个人空间短消息加为好友

小中大

生物指示剂的D值如何检测呀？目前是按照哪个标准检测的？

finger[使用道具]
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发表于 2015-5-3 18:01 资料个人空间短消息加为好友

小中大

是否需要对地面进行检测（ABCD级）？标准如何制定？

JK.jon[使用道具]
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发表于 2015-5-3 18:01 资料个人空间短消息加为好友

小中大

请教微生物质粒移植、质粒丢失和质粒消除的问题。
（1）不同类型的细菌质粒能否相互移植？一种细菌能否移植几种质粒？
（2）如果移植，移方（摘取质粒的一方）遗传基因和抗药特性是否相应消除？而被移植的一方相应获取前方所消除的这些？
（3）消除质粒与质粒丢失是不是一会事？（消除质粒是不是人为的除去质粒？质粒丢失是不是在实验室人为不小心弄丢失？）

okhaha[使用道具]
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发表于 2015-5-3 18:02 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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原帖由 JK.jon 于 2015-5-3 18:01 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

请教微生物质粒移植、质粒丢失和质粒消除的问题。
（1）不同类型的细菌质粒能否相互移植？一种细菌能否移植几种质粒？
（2）如果移植，移方（摘取质粒的一方）遗传基因和抗药特性是否相应消除？而被移植的一方相应获取前方所消除的 ...

我来浅薄回答一下大概
质粒，DNA片段
和细胞一起培养，能不能被吞噬进去是看运气的
所以转染是靠运气的
吞噬之后，能不能重组到基因之中，重组到哪个位置，也是看运气的
所以要有所为的筛选步骤、挑克隆步骤
就算位置对了，表达对了，之后细胞会不会排斥，突变等等，也是看运气的……好吧，有时候看起来转染成功了，但不代表它是稳定表达的，所以细胞株、细菌种子建库都需要做稳定性试验……
分子层面的知识，本人十分欠缺，中午休息时间帮你开贴讨论，谢谢支持！

bs4665[使用道具]
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发表于 2015-5-3 18:02 资料个人空间短消息加为好友

小中大

1.表面微生物验证方法？
2. 消毒液有效期的验证等微生物实验室的支持验证体系能否详细的讲解一下？

dior[使用道具]
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发表于 2015-5-3 18:02 资料个人空间短消息加为好友

小中大

生物指示剂

dog002[使用道具]
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