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标题:[未解决]得到的得率都好低,最高只有4%左右

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翔少爷[使用道具]
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得到的得率都好低,最高只有4%左右

看到文献上使用不同提取方法得到的米糠多糖得率都达到2%左右。我最近在做米糠多糖的提取,分别使用超声和高温高压两种方法,使用单因素试验对超声考察超声温度、时间、功率和料液比,对高温高压提取考察温度、料液比和时间,得到的得率都好低,最高只有4%左右。为什么别人读那么容易得到较高的得率,我做起来就那么低?
   我的提取方法是:脱脂米糠5g,按照料液比加水在提取条件下提取,提取液离心,调PH6,加1% α-淀粉酶,60度水浴2h,调PH4,加1%糖化酶,50度水浴2h,加1ml的20U胃蛋白酶,37度水浴1h,调PH7,离心,过滤,上清加400ml 95%的乙醇,4度静置24h,离心,取沉淀通风厨挥干,称重,得粗多糖。称取粗多糖10mg,使用重蒸水定容到50ml,吸取2ml加到试管,加1ml5%苯酚和5ml浓硫酸,反应30min,490nm测定吸光度。标准葡萄糖的标准曲线按照NY/T 1676-2008制作。最后计算出粗多糖的纯度只有6~9%,多糖的得率最高只有4%左右,不知道哪一步有问题,请高手指点一二。
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grace![使用道具]
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曲线正常,A=0.03741C+0.01289,相关系数R2=0.9965。
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