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标题:【求助】用过transwell或养过Caco-2细胞的请进

feiya[使用道具]
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发表于 2015-5-11 16:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你好！请问你用的是哪个型号的板啊？细胞密度有多大？谢谢！
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feiya[使用道具]
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发表于 2015-5-11 16:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我得只在中间有点细胞， 种前也计数了，按2*10的5次方种的，但只有稀稀拉拉的几个细胞，很崩溃啊！
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zhy平平[使用道具]
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发表于 2015-5-11 16:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我是广州的，正在养caco2，目前长得不错，感觉还是要进口血清。只是在消化时发现这种细胞真的很容易成块掉下来，吹打也很难完全吹散，所以种板时容易成团。大家继续交流啊，受益匪浅！
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阿敏[使用道具]
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发表于 2015-5-11 16:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

问个小问题，就是种在24孔板的millicell，miliicell的直径是12毫米，那膜的面积应该是3.14*0.6*0.6=1.1平方厘米吧，但是我怎麽查到的文献是0.6平方厘米呢？
另外就是空白电阻的测定，是将一个不种细胞的millicell加培养基后测吗，然后一直培养，每次测电阻时，以它为空白，还是总共测一次空白电阻就可以，谢谢
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tudou85[使用道具]
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发表于 2015-5-11 16:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也要开始养Caco-2细胞了，说是需要测电阻值，不知道在测得时候怎么样能够保证无菌状态呀！
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any333[使用道具]
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发表于 2015-5-11 16:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请教各位，我是新手，能否介绍几个测TEER的细胞电位仪的厂家及报价吗，一般用那个品牌的性价比高，我们实验室刚开始做Caco2实验，老板不可能买太贵的仪器。我查过evom resistance voltohm meter，上海有，报价2万多，太贵了。谢谢。
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vvmmoy[使用道具]
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发表于 2015-5-11 16:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我的细胞 养着养着 现在都不见了 不知道怎么回事 在膜上和瓶里都是这样的 不知道怎么回事 刚开始接种到膜上和瓶里都蛮好的 结果现在 只见膜上中央有一层镜下观察到的不清楚的蒙蒙一团东西 疑似细胞分泌物 怎么除去它呢？我的细胞怎么了？ 急！！！ 希望高手指教 不甚感激！！
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发表于 2015-5-11 16:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

很可能是你接种的时候细胞没有弄均匀，都集中在中间，还有transwell膜是半透明的，在显微镜下你无法看到细胞及细胞形态
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www.1[使用道具]
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发表于 2015-5-11 16:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
transwell细胞小室实验中upper chamber细胞数和均匀度很重要，一般在制备单细胞悬液时要求吹打均匀，100次左右，这样种的细胞就不会出现集中性或四周密集型生长的特性。而且在进行细胞计数时我们一般计数一块计数板的8个大方格细胞数/8 *10000.

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吹打100次？？？这么多次不会影响细胞的活力吗？毕竟机械损伤也是有影响的。我做的transwell也感觉少中间部分扎堆，边缘细胞比较少，分布不是很均匀。这好像是跟液体张力之类的物理学原理有关吧。我种的24孔板也是中间密度很高，周围很低，接种前已经吹打很多次之后才加样的啊。不知道各位站友有什么好办法？
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jude[使用道具]
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发表于 2015-5-11 16:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问一般铺胶的浓度是多少？？？
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