细胞世界

我用的0.06%的胰酶，一边水浴37度一边低速磁力搅拌（机器不好不知道转速），每次8分钟的消化都有很多鼻涕状的东西。。吹散后离心也有絮状物，结果细胞数量很少。都3天了，还是没多少细胞，不过都是清亮的，所以还想养看看。细胞周围会有大片大片的透明的膜状物，那是什么啊？？

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比较明显的症状是细胞消化过度了，消化可以不用搅拌，摇一摇也是可以的，还有吸取上清可能会比较慢，在消化时就不要点酒精灯，酒精灯会产生局部高温增强酶的活力，使细胞消化过度；消化液也不要放37度预热，室温放置就行，环境温度较高时，细胞也很有可能也会消化过度。

您说的这种情况，我也遇到过，但很抱歉，无法给你比较合理的解释。
一种现象，被后的原因可能会有多种，因此可能需要具体情况具体分析，你用的C57小鼠，我没做过，有可能会和SD乳鼠心肌细胞存在差异，所以不能生搬硬套的给你一些解释，很可能我说的就是错的。
但我想提一下，细胞聚团是不是一个不好的现象，还是这本身就是心肌细胞一种的正常现象？这样聚团现象是不是对你的实验有很大的不良影响，这个问题是不是一定需要解决的？谢谢这位战友的支持！
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谢谢！我只是觉得聚团很丑，然后心肌细胞没铺开，不过今天和昨天看铺的比较开了，个人感觉是控制成纤维的生长很重要，再次感谢您一直以来的帮助。

看了前面的帖子，受益匪浅，多谢lz的悉心解答让我增长了不少知识。
我也是在进行心肌细胞的培养，之前一直失败，后来听别人说我吹打的力气太轻了，每次都没有把组织块吹打起来，从而细胞大部分还黏在上面，又进行下一步的消化了，所以的出来的细胞大部分已经死了。
后来加大力度吹打以后，成功了1-2次，现在又出现了细胞全部死亡的现象，步骤，方法，力度和原来几乎相似。我和lz的实验方法相似，也是胰酶和胶原酶混合（均为0.08%)，37度消化，间断手摇，吹打，吸取上清。
这几次失败的时候发现在4-5次消化时组织块就蓬松胀大，大概是原来的2倍左右，消化吹打以后组织块周围漂浮了很多絮状物质，像是没有完全消化的组织，如果吸取上清的话很容易把絮状物吸出来，这样离心的话很不容易全部沉淀弃上清。在最后一部离心重悬后消化液变的很粘稠，过筛时根本下不去。
请教楼主这种情况是消化还不到火候么？是不是需要在继续延长时间？谢谢！！
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个人觉得一旦出现絮状物质，一般不是什么好东西，如果离心重悬后消化液很稠，连过筛都不行，建议吹打散试试，不过可能细胞状态也不行了。
我估计是消化过度，少量多次，我觉得吹打不在于力气大小，更要注意速度要慢，但振幅要大，即要把细胞吹散，但又不至于对细胞形成太大的冲力，同时要注意避免气泡产生。
我也是从不行到现在还可以，你也加油，一定行的。

第一次养心肌细胞，麻烦各位大侠看看怎么回事，我觉得可能是消化过度，吹打不匀，这是低倍镜下拍摄的

这是高倍镜下的，已经养了5天了。。很不健康

一堆一堆的，是不是就是吹打没吹散？

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感觉像是细胞碎片，没有完整的细胞轮廓，也不是正常心肌细胞那样成簇生长。而且杂质特别多。应该不是没吹散。另外，细胞很稀啊。