药物分析

我最近做血清中中药成分的指纹图谱，空白组血清和给药组血清在图谱上没有明显的区别，做了好几种血清的处理方法，但都是没有区别，但在大鼠的尿中能检测出来。请各位高手帮忙分析一下。是不是还是血清的处理不够好？有没有比较好的血清处理方法能使血清中含药成分能更好的富集？

应该是血清中浓度太低了！

加大采血量，提取血清，通过萃取浓缩或冷冻干燥等浓缩技术富集待测物。也可以考虑固相萃取。

加热后醇沉　
1、空白血清的制备
实验前小鼠灌服生理盐水 0. 02 mL/ g再制备血清: ① 未处理血清:小鼠摘眼球取血 ,放置30min ,3 000 r/ min离心 10 min ,取上层血清备用; ②56 ℃ 加热30 min（处理血清，离心如前 ,取出血清后置于 56 ℃恒温水槽中加热灭活30 min） ;所得血清再以50 %乙醇沉淀 ,3 000 r/ min 离心 5 min ,分离上清液备用;

2、含药血清制备：给小鼠灌服药物 ,给药后一定时间后取血 ,分离血清 ,再按上述方法处理血清。
如果加热后醇沉，不行可以采用醇沉后加热，就是把上述步骤 ②中反过来做一次试试。

我用过甲醇、乙腈、乙酸乙酯、高氯酸这几种方法来处理血清，做液相时空白血清和含药血清图谱上显示没什么差异，中药给药量也挺大的，血清里面应该有东西的，就是检测不出来。请给点意见

为什么要热后再醇沉？不用灭活吧。你做过，用50%甲醇醇沉效果如何？

你做药里都有哪些成分和检测方法也应该说一下

lz可以考虑固相萃取，复溶时提高浓度测测~

成分主要是异黄酮类和皂苷类，检测方法用HPLC-DAD检测

异黄酮类首过效应比较明显，皂苷的紫外吸收不好，这些因素都会导致检测不到

把灌胃液加入血清处理后看看能不能检测出来？