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标题:正确使用高效液相色谱仪的几点建议
swn_nyve_vb
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1
发表于 2011-5-22 14:28
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正确使用高效液相色谱仪的几点建议
随着药品检验设备的不断增加,
高效液相色谱仪
已经普及到各个地市药品检验所。药品检验人员对
高效液相色谱仪
的使用水平也需要不断提高,
高效液相色谱仪
的寿命和合理正确的使用是分不开的,所以本人就实际工作中使用
高效液相色谱仪
时容易忽略的地方,总结几点建议供大家参考。
第一、流动相使用前必须经脱气和过滤处理。
第二、避免流动相组成及极性的剧烈变化。当流动相中含有缓冲溶液(酸,盐,碱),不要直接切换到强溶剂,应该先用无缓冲流动相(即把缓冲液换成水)冲洗 20~30min后,再更换强溶剂,更换流动相时,流速应不超过0.5ml/min。如果突然切换到高浓度有机溶剂,可能会使HPLC流动体系中的缓冲液沉淀,这样会导致更大的问题如柱头堵塞、管道堵塞、泵泄漏、活塞损伤或进样阀转轴失灵。
第三、更换色谱柱前,须对使用的色谱柱进行冲洗(如应用的流动相含有酸或无机盐,应当用20倍柱体积纯净水冲洗干净)、平衡后,保存在有机溶剂中(最好是乙腈或甲醇中)。
第四、取下色谱柱时,应立即将两端接头封口。除特殊情况外,一般都应使用预保护柱。
第五、测试完毕后,切忌直接用纯有机溶剂冲洗柱子,须用90%水-10%有机溶剂冲洗至少40min后,再用有机溶剂冲洗30min左右,最后将色谱柱保存在有机溶剂中。
第六、吸滤头每周用5%硝酸水溶液超声清洗1次。
对于上二点补充一下:
流动相切换时,采用中间过程,50%的水平衡一下,后用水相,再到盐
还有就是冲柱也要这样的,从水相到有机相,直接切换会造成单相阀堵的,本人用岛津和waters均有此情况发生。
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本帖最后由 swn_nyve_vb 于 2011-5-22 14:30 编辑
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