手性分析

想请教一下：用液相流动相添加剂做手性拆分时 老是有这种问题 就是改变条件时 每次遇到交差点就不重现 也就是同样的条件重现不出来 真郁闷请问怎么解决这个问题

还有一个问题就是一般液相的保留时间和分离度两针之间分别相差多少时就说重现性还好

[ 本帖最后由 miracle 于 2011-5-25 11:01 编辑 ]

同条件重现时结果相差多少？
同一天同一液相条件走的样品的保留时间和分离度应该不会有太大差别。
可能是液相没有平衡好；还有可能是流动相中有气泡；室温此也有影响（走样时尽量不要开窗户）。

1）样品稀一点；
2）分析重复性：一批-６次，被分析物 %RSD ≤ 2.0，杂质 %RSD  20.0

楼主是采用手性流动相添加剂法拆分对映体，同样的条件重复不出来？？

是采用同一批次配制的流动相，重复进样，色谱峰保留时间及分离度不能重现吗？若是不同批次配制的流动相，需注意保持操作条件的一致，比如pH值及摩尔浓度等，不能有太大偏差。

另外，方便告知流动相中的手性添加剂吗？注意其在水相和有机相中的溶解度，防止两相混合析出而堵塞柱头等意外发生。

关于重现性，HPLC法通常来讲，保留时间很稳定的，都能百分之百重复上，以数字来评价的话，如3楼所言，看峰保留时间及峰面积的RSD。

是仪器性能不够稳定？

一般来说，流动相的重现性会较差，尤其是当我们的称量或量取又不十分严格的情况下。还有手性拆分受温度的影响较大，不知道楼主有没有注意到。如果是连续两针进样重现性较差，可以从以下几方面考虑：1、系统有没有平衡好、2、是手动还是自动进样、3、峰形分离情况怎么样、4、是保留时间重现性不好还是峰形重现性不好抑或只是峰面积重现不好。

先去查一查你的仪器系统误差是多大, 就是inject 40~60次丙酮,不连柱子, UV设在270nm, 看一看第一次与最后一次的误差有多大.

直接将流动相按比例混合后用单通道进样。 尤其用的泵是4元泵时，2个流动相比例又很大时，实际混合的比例与理论值的误差会比较大。索性混合
后用单通道走流动相。