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标题:做液相色谱过程中一些心得,从0到有些感性和理性的认识

heyugudu[使用道具]
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我在用液相作指纹图谱,有个问题始终不太明白:如果我做的图就是有一个成分在同样的检测条件下是倒峰,行不行?但是别的文献上都没有出现过倒峰,不知是何原因?

我们在实验中也出现过这种情况,想必是由于进样的溶剂与流动相不同,这样在基线平衡的时候,由于紫外吸收不一样,就会出现倒峰了,用流动相直接溶解样品试试,应该可以解决这个问题了Smile
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guyanyehua[使用道具]
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各位大虾,我是半路出家做分析,对液相一知半解,我现在用乙腈:水16:84作流动相分析样品中的芍药苷,样品是经醇提后直接稀释用0.45um滤膜处理后进样,前面出峰很多,不过芍药苷峰还是分得不错,就是后面的出峰时间很长(芍药苷峰在12min,后面到50min还有峰出来),我想知道有没有什么好的方法可以解决这个问题啊?(我考虑用梯度法,将芍药苷后面的东西快速冲出来,但是我这里不能作梯度,另外就是用溶剂将对样品进行预处理,但是也得考虑回收率的问题,)希望大家给我一点指导,谢谢了!!
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nescafe[使用道具]
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我想这是由于你的样品组分非常复杂的缘故。你可以尝试,在芍药苷峰出后,用进样注射器进一针乙腈,可能可以使它快速出来,就不用等太长时间了。不妨试试看
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406101675[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 guyanyehua 于 2011-5-31 11:54 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
各位大虾,我是半路出家做分析,对液相一知半解,我现在用乙腈:水16:84作流动相分析样品中的芍药苷,样品是经醇提后直接稀释用0.45um滤膜处理后进样,前面出峰很多,不过芍药苷峰还是分得不错,就是后面的出峰时间很长(芍药苷峰在12mi ...

如果你仅仅分析芍药苷的含量或者所要分析的峰在一定时间都出来了,那也没关系的,其他的峰您可以不予考虑,在50min或适当的时间停止,再用100%的乙腈洗柱,然后用流动相乙腈:水(16:84)平衡。这些动作均可以在Agilent 的Chemstation 软件上实现。
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wxw1981_2001[使用道具]
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我用的是waters  atlantics柱子。在使用前一定要仔细阅读柱子使用说明书,它会表明柱子耐压程度,pH范围,如何清洗再生等。做生物样品时,一定要加上保护柱,定期的冲洗保护柱。或反冲保护柱,此时不要与检测器相连。反冲柱子前与柱子厂家联系看是否能反冲。waters柱子前后填料很紧可以反冲,用乙腈和水不同比例冲洗,时间不宜过长二小时即可。
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