液相色谱

向各位请教一个问题：高效液相色谱仪的图谱中样品的出峰时间与标准品的出峰时间相差将近两分钟，整个梯度洗脱时间是80分钟。
谢谢。。。

在连续进样时要充分平衡好再进下一针！

有多少个化合物需要分离？梯度洗脱还得80分钟，my god
把标准添加到待测物中看保留时间，如果标品也出在样品峰的位置，就说明是基体效应导致的，定量需要用标准加入法；如果标品还是出峰在原标品的位置并跟样品峰有所分离，就说明样品和标品不是一个东西，需要对样品峰重新定性。
还有一点需要了解下，标品是在多少分钟洗脱的？峰宽有多少分钟？

是每次这样还是每针都有变化，还有标准品什么时候出峰，如果十分钟就出来了差一分钟肯定不行，但是半个小时以上而且手动进样还是可以接受的

是不是没有平衡好呢？理论上应该不会有那么大的差别。

保留时间相差太大，不靠谱。
是否是未平衡好呢？譬如第一针的时候，或者在连续进样情况下，梯度缓冲回起始平衡点的时间不够呢？（如起始点A:B=8:2，但结束点A:B=5:5，这种情况需要一段时间，重新平衡至起始点比例，否则保留时间漂移）
柱温，有影响，但保留时间不会相差2min这么多；流动相组分变化，若样品有酸碱性，且流动相pH与样品pKa相近，需要注意，pH在pKa正负1范围内，保留时间变化很大，若不属于这种情况，pH应该不会造成保留时间相差2min。

进一针混标吧  那样结果很明显的

是手动进样
因该是同一个吧
洗脱时间80分钟也不行吗？