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标题:[未解决]关于木糖标准曲线的问题

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
xly123987[使用道具]
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发表于 2011-6-13 15:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

关于木糖标准曲线的问题

最近做木糖的标准曲线，用的是间苯三酚法，做出来的相关系数老是很低，在0.98左右，而且截距比较大，基本上大于0.1，不知道怎么回事，
    另外，我用的是双波长法，大家都说吸光值在0.2-0.8之间比较好，那对于双波长法，是每个波长处的吸光值都要在0.2-0.8之间，还是吸光值差在0.2-0.8之间就行了。
    我是初学者，好多不懂，麻烦知道的指点一二，不胜感激。
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猴子[使用道具]
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发表于 2011-6-13 17:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #1 xly123987 的帖子

直接检测的信号值在0.2~0.8之间。
可以把具体过程和结果都陈列一下吗？既然是做标线，那就是直接配制一系列不同浓度的标品溶液，不需要双波长吧？难道是用基体溶液配的？这块不太明白。
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scattering[使用道具]
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发表于 2011-6-13 18:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
每个波长处的吸光值都要在0.2-0.8之间.
相关系数不行，原因太多。
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fence-straddler[使用道具]
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发表于 2011-6-14 07:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #1 xly123987 的帖子

是同时检测两个东西呀，这样要用到两次beer定律，两个吸光系数值，无形中就增加了测量误差，我认为线性系数0.98已经很不错了！
提高线性的方法可以尝试：
1、缩小浓度范围。
2、增加浓度点。测量的浓度点越多，同样置信度下，相关系数要求越宽，而且测量结果的相对误差也越小。
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ttkl533[使用道具]
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发表于 2011-6-14 10:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 QQ

 小中大
做标准曲线对截距有要求么？我也新手，大家互相学习！
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yfdihdx[使用道具]
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发表于 2011-6-14 10:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
手法问题  那个值到不一定啊   有时候可以超过的啊   我们有标曲都在1以上去了
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fence-straddler[使用道具]
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发表于 2011-6-14 18:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #5 ttkl533 的帖子

线性是在一定浓度范围内的线性，截距不需要归零。
当然，如果是做极低浓度的样品，只要线性好，可以强制截距归零，这样理论上可以测检出限以上样品的含量了。
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suyrain[使用道具]
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发表于 2011-6-18 10:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
截距比较大应该是你的样品浓度太低，基线噪音的影响较大导致，可以增大浓度。
线性相关系数较小应该是你的线性浓度范围太宽，调整窄些试试看。
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utek[使用道具]
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发表于 2011-6-18 10:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
相关系数法不知道。
吸光值在0.2-0.8之间是每个波长处的吸光值都要在0.2-0.8之间，表示在较好的测量范围内；不是吸光值差在0.2-0.8之间，那就差太多了。
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