我正在做胞内NAD、NADH的检测,目前用HPLC检测,我用的流动相是
(乙腈:含有10mM四丁基溴化铵的300mM 磷酸钠缓冲液ph7.0=4:96),色谱柱:C18反相柱。
NADH标准品用的是NADH二钠盐(买不到NADH),
检测样品中的NAD的峰比较明显,但NADH的峰十分微弱,请问各位高手:
第一,是否NADH二钠盐与NADH出峰时间不一致,还是流动相不适合导致NADH出峰不明显?
第二,NAD的峰与其他杂质峰分得不是很开,而NADH的分离度较好。样品的ph值约为6.5。
所以请问:有什么办法可以使峰的分离度更好些?
谢谢!
NADH结构式:
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本帖最后由 090820040 于 2011-6-27 15:17 编辑 ]