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标题:【讨论帖】种好你的96孔板

remonte[使用道具]
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发表于 2015-6-9 18:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

本人也种96孔板比较有经验。和楼主的方法类似，但是前提是在加入混匀的细胞悬液前用少量的培养液铺好板，减少表面张力，那样加入细胞悬液后细胞就会均匀流向板的每一个部分，稍微静置就可以放入培养箱。绝对均匀！
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dodoit[使用道具]
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发表于 2015-6-9 18:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢楼主了，刚要开始做96孔板，这个经验相信有非常大的用处。
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xue258[使用道具]
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发表于 2015-6-9 18:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
本人也种96孔板比较有经验。和楼主的方法类似，但是前提是在加入混匀的细胞悬液前用少量的培养液铺好板，减少表面张力，那样加入细胞悬液后细胞就会均匀流向板的每一个部分，稍微静置就可以放入培养箱。绝对均匀！

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在加入混匀的细胞悬液用多少培养液铺板呀 我做了好长时间实验了 铺96孔板 太让人头疼了 总是中间特别稀 你一般每孔铺多少细胞呀？谢谢了
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chengjie79[使用道具]
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发表于 2015-6-9 18:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

24孔板都没种好，总是周围多，中间少
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chengjie79[使用道具]
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发表于 2015-6-9 18:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

用振荡器一震不就都哦了吗，很均匀哦
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tewank[使用道具]
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发表于 2015-6-9 18:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 chengjie79 于 2015-6-9 18:03 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

用振荡器一震不就都哦了吗，很均匀哦

你试过震荡96孔板吗？100ul会不会洒出来？
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tewank[使用道具]
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发表于 2015-6-9 18:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

还有个人认为，解决边缘效应和铺板不匀的方法就是增加培养基的量，96孔板正准备尝试，以前做24孔板，6孔板都是，增加培养基后，比如6孔板加1.5-2ml培养基，左右来回摇两下就匀了，就好像你把一把沙子放在盘子里怎么都摇不匀，放在锅里多加点水两下就匀了。
因为以前为了省培养基出现过这种问题，后来解决了。不知道和大家讨论的问题是否一样。
另外不知道96孔板是否也可以用此方法提高铺板成功率，准备试一下。
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发表于 2015-6-9 18:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
学习了。疑问也是，把细胞放置20分钟再送回孵箱，不会影响细胞生长状态吗？
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ztonyc[使用道具]
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发表于 2015-6-9 18:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我用普通的排枪，先在50mlEP管里不停地吹打，打到20~30次左右，然后用移液枪加到皿里，再从皿里六个六个地用排枪铺板，铺板的时候用200u的液体去铺，貌似还行，不过我就做MTT，对细胞均匀性要求不是太高。。。
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sistis[使用道具]
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发表于 2015-6-9 18:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我听过两个在国外有多年试验经验的人分别介绍这种方法，老方法会使皿中间的细胞少，摇的时候，前后摇过，等液体不动了，再左右摇。新方法一定要慢加，细胞要稀释的匀，种了几孔后要再次混匀。

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请问如果种完就需要马上加药该怎么办？ 我的是悬浮细胞……
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