同条件下不同时间做的图谱出峰时间延后十来分钟的原因

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标题:[未解决]同条件下不同时间做的图谱出峰时间延后十来分钟的原因

[未解决]本主题悬赏可用分 10

xuxiaohong[使用道具]
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发表于 2011-7-8 11:45 资料个人空间短消息加为好友

小中大

各位前辈请指教，今天我做HPLC，在和昨天同样的色谱条件下，今天出峰的时间是昨天的两倍（昨天7分多钟出峰，今天15分钟出峰），请问有可能是什么原因导致的呢，多谢！

猴子[使用道具]
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发表于 2011-7-8 19:15 资料个人空间短消息加为好友

小中大

回复 #1 xuxiaohong 的帖子

1、先确定这两针都是在系统已稳定好的前提下做的
2、确定两次用的色谱条件是一样的（主要是流速、流动相配比、色谱柱是否更换）
3、确定样品是一致的，不存在样品变质
4、检查系统有无漏液
5、检查泵的流速是否为设定值（用量筒接废液测流速）

排除了以上这些，就只能说明是柱子污染了，冲柱子。

gitde[使用道具]
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发表于 2011-7-9 17:47 资料个人空间短消息加为好友

小中大

流动相配制的比例有问题，或PH问题，两天不可能完全一样。温度也有影响，但不会那么大。

hewen0925[使用道具]
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发表于 2011-7-9 17:47 资料个人空间短消息加为好友

小中大

检查一下流动相是否有问题
方法是否有更改？
色谱柱是不是还需要继续平衡呀

entd_jps[使用道具]
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发表于 2011-7-9 17:48 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 xuxiaohong 于 2011-7-8 11:45 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
各位前辈请指教，今天我做HPLC，在和昨天同样的色谱条件下，今天出峰的时间是昨天的两倍（昨天7分多钟出峰，今天15分钟出峰），请问有可能是什么原因导致的呢，多谢！ ...

若分析方法完全相同，造成保留时间相差较大的原因，很可能是流动相pH。流动相pH在样品pKa正负1范围内变化，保留时间变化很大。

kong0908[使用道具]
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发表于 2011-7-9 17:48 资料个人空间短消息加为好友

小中大

流动相的比例或者是流动相的ph

luffygonww[使用道具]
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发表于 2011-7-9 17:48 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你确定是同等条件吗？首先查看压力是否正常？

panxiang8871[使用道具]
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