液相色谱

这是当然的，一般梯度洗脱时，随着流动相中有机相强度的增大，会将有机相中的杂质洗脱出来，所以最好用进口的色谱纯试剂和超纯水。还有建议作一个空白比对以及样品空白比对，有了这两张图之后就可以对自己的基线漂移进行判定了，是溶剂进行梯度切换时带来的影响，还是样品杂质？
一般的说作梯度时基线是有一定的漂移的，这具体漂移多少算过量，还要具体情况具体分析～特别是像你的流动相里还有盐。

1.流动相不纯是其中之一，尤其是盐的含量较大，更容易不平稳。比如如果你用分析级的甲醇或乙腈，甚至是已永远走不稳的
2.色谱柱是不是被污染了，这个的话可以通过压力的增大来判断；另外，如果使用保护柱或预柱，就拆下来再试验
3.仪器的管路是否被污染，尤其是泵上的滤头等处，建议一段时间后就更换

请分别测一下流动相A和B的吸光度或吸收光谱，看是否有区别！

请分别测一下流动相A和B的吸光度或吸收光谱，看是否有区别！

个人意见
1、梯度洗脱的时候基线下滑是常出现的，如果不干扰你的实验，可以不考虑，或者选择合适的梯度变化条件或恒度洗脱；
2、梯度洗脱的基线下滑原因较多，常见的有：
流动相比例变化：导致紫外吸收的变化，如果能保证前后的盐浓度一致，可以降低基线漂移；
仪器存在问题：做仪器自检，确定仪器紫外灯，光路系统，流路系统正常
检测波长过低：过低的波长，流动相会存在吸收，导致流动相比例变化，基线漂移
流动相有杂质：选择进口试剂或者质量有保证的试剂
色谱柱：在高强度盐下，色谱柱会损坏较快，应该确保色谱柱合适
3、在您的流动相体系下，漂移存在是正常的，但是不知道您的漂移是否会影响结果，最好能有基本的色谱条件，这样比较好看问题？

[ 本帖最后由 北漂的斌儿 于 2011-7-16 00:26 编辑 ]

应该是减少的流动相中有一个污染物所致

楼主是不是走得很广的梯度，一般走大梯度的话基线都会越走越低的。不影响出峰就行了。

楼主是不是走得很广的梯度，一般走大梯度的话基线都会越走越低的。不影响出峰就行了。

是否考虑是检测器出了问题！检测器对物质的响应有了很大的变化.

脏了，基线会上升！下滑会不会是平衡不够！