小中大原料药杂质检测，液相色谱保留时间问题？
情况是这样的，我做原料药杂质检测，用的是C18柱，三个杂质和一个主成分，三个杂质在前面，主成分在后面，通过切换阀把主成分切掉，不进检测器。
现在遇到的问题是，前面已经进过50多针，保留时间稳定，没什么问题。而现在，在流动相条件没有变化（试剂也都没换过），柱压也正常的情况下，主成分往前跑了，昨天是跑到跟最后一个杂质一样的位置，今天跑到了最后一个杂质前面。换了另一根C18柱试，出峰顺序是正常的。
在出问题前只是进了一针片剂提取后的样品，是用100%的乙醇提取的（大概600mg加2ml乙醇），离心后取上清，加20%甲醇水稀释了5倍，再次离心了一次，取上清进样5ul。这样会使色谱柱改性吗？
