液相色谱

我们有个样品流动相是乙腈：水=10：90，检测波长254nm，流速0.8ml/min

样品是直接用流动相溶解的，这样按理说不会有负峰，以前也是一直没有负峰出现的，但最近测试时在2分钟左右的位置总会出现一个负峰，峰高约0.5mau，主峰出现在4分钟左右，峰高月2000mau。

我重新配置了流动相、更换了色谱柱都不能解决的问题，请问为什么以前一直没负峰，而最近突然有负峰出现了?

另外不知道跟试剂有没有关系?我们以前用的乙腈是500ml/瓶的国产试剂，最近换成4L/瓶的进口试剂了，试剂都是色谱纯的

紫外检测器出负峰的原因是由于以下原因：

1、样品中含有比流动相中吸光度小的物质。

2、检测器的极性倒置。

估计楼主是由于前一种原因所致，而出现这种情况的一般原因是由于流动相本身的品质不良所致，而流动相中主要是由于水所致，一般来说液相色谱所用的水为二次蒸馏水或者纯化水，注意纯化水设备长时间使用会产生一定问题，要注意清洗，所以建议楼主用好品质的水冲洗系统之后应该就可以了。

做HPLC的的确容易出现这个问题，有时是会出负峰的，这多和溶剂有关，但有时也和仪器有关，建议可以更

换个溶剂，比如换成甲醇。