手性分析

]各位手性拆分的高手们：
     本人最近涉及到手性拆分，想对一个中药里面的两对手性化合物进行拆分，该类化合物是芥子苷类，极性很大，我采用的是资生堂Chiral CD-PPH，4.6*250mm长柱，所采用的流动相为ACN-0.1%TEAA;  ACN-30mmol乙酸铵；（ACN-加四氢呋喃5:1）-30mmol乙酸铵；ACN-30mmol高氯酸钠等，有两个化合物就是很难分开，分离度只有1.0左右，想定量分析，这样不能达到定量的标准，请问各位是否能给小弟一些帮助，很是感激！

Chiral CD-Ph系改性beta-环糊精作为手性填料的色谱柱，CD-Ph，即phenylcarbamate ß-cyclodextrin。该手性柱的使用说明书，楼主有吗？

其实，每根手性柱适合分离的化合物都有一定的范围，需要筛选不同的手性柱来分析，同时优化流动相，既然楼主在Chiral CD-Ph柱上已经观察到分离迹象了，那就再优化一下流动相条件吧。

另，从楼主给出的图谱来看，样品还是比较“脏”的，建议尽量去除其他成分再做手性分析。

Chiral CD-Ph柱方法开发指南




[ 本帖最后由 aa_tang 于 2011-8-2 14:36 编辑 ]

我认为可以定量

手性化合物即使用正相柱也是很难分开的，而且你是苷类化合物，极性很大，会被吸附的。你可以让梯度洗脱时间再变长点，或者水相变成95%试试。不然换个安捷伦的柱子。还是不行的话只有用手性柱了，消耗很高的

因为你也看见我的流动相系统了，换了很多，但是还是不如意，该化合物记性太大了，且我的水相变化已经很小了，时间也很长了，现在0.1%TEAA效果就是上图所示的，目前最好的系统，不知道各位有什么好的建议？ACN中加THF，一般比例是多少？我按5:1比例，感觉效果不好，请各位高手多指点！

因为就是想直接对中药直接定量，减少前面前处理的麻烦，所以前处理就比较简单，70%甲醇回流1h，请问前处理需要怎么改进？谢谢

没有基线分离，定量怕不准确，听说可以叫内标，请问内表上有和建议？

麻烦把sheisido chiral CD-PH手性柱的使用说明书给我一份，谢谢

提高分离效果的方法：更换流动相（缓冲盐、盐浓度、有机相成份）、溶解方法、柱子、是否加热、PH是否随梯度变化等，建议楼主多尝试几种方法，毕竟中药成分复杂，在不清楚两种具体成份的前提下只能通过多种方法进行对比

中药提取液成分确实会比较复杂，提取后是否可以增加液液萃取等前处理操作，除去一些与带测物极性差异比较大的其他成分。