液相色谱 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】怎么延长保留时间，使峰分开？

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 12  1/2 12››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】怎么延长保留时间，使峰分开？

wsll[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76794
精华 0
积分 423
帖子 505
信誉分 100
可用分 3393
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-9
状态 离线
1

发表于 2015-6-23 16:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】怎么延长保留时间，使峰分开？


所有峰都在12分钟左右出来了，我要的峰在7.3min左右，但7.1min左右有一个峰和我要的峰重叠了，我想把峰的保留时间拉长！
流动相甲醇-水=25:75，  要延长保留时间，是不是要降低甲醇的比例呀？还有其他方法吗？

还有我感觉提取物中的成分应该很复杂，但药典上给的流动相又是甲醇-水=25:75，等度洗脱，甲醇的比例这么低，不是很多成分冲不出柱子，我需要每进完一针，用高浓度的甲醇冲洗柱子，再平衡；还是不用管残留在柱子的东西，每次基线平了，就进下一针？（这样会不会柱效越来越低）

请高手解答，万分感谢！
顶部
JK.jon[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75188
精华 1
积分 528
帖子 652
信誉分 102
可用分 4146
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
2

发表于 2015-6-23 16:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
降低甲醇的比例，或者换更长的柱子。怀疑后面还有杂质，可以走一个梯度看看
顶部
langlang[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77033
精华 0
积分 668
帖子 976
信誉分 100
可用分 5741
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-12
状态 离线
3

发表于 2015-6-23 16:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
甲醇比例够的了，可能换柱子好些。赞同楼上的观点。
顶部
veiwu[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 107977
精华 1
积分 513
帖子 662
信誉分 102
可用分 4122
专家分 10
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
4

发表于 2015-6-23 16:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
正常的是减少有机相的比例和减低流速、降低柱温等操作使保留时间后移，实在不行的话要考虑加入一些离子对试剂，当然也有可能色谱柱的选择有问题
顶部
finger[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 71816
精华 0
积分 574
帖子 787
信誉分 100
可用分 4799
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-8-31
状态 离线
5

发表于 2015-6-23 16:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

为什么我的回复都要什么审核呢
顶部
zhezhe[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72891
精华 1
积分 610
帖子 856
信誉分 102
可用分 5088
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-15
状态 离线
6

发表于 2015-6-23 17:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
如果没有分开：减少甲醇比例，降低流速，或者更换更长的柱子，药典要求的流动相组分是不能变的
如果是上一针的残留：还有你可能冲的时间不够，有残留成分，多冲一段时间看看后面有没有峰
顶部
dior[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72222
精华 1
积分 582
帖子 819
信誉分 102
可用分 4906
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-6
状态 离线
7

发表于 2015-6-23 17:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢大家帮忙

我把甲醇-水从25:75改成20:80，峰分得很开！

不过我还是不太明白，中药提取物的成分这么复杂，甲醇比例这么低，多冲下，也能把杂质冲出来吗？等梯度甲醇这样跑，基线平了就可以进样吗？
会不会有些成分，用比例低的甲醇冲很久都不会出峰，还吸附在柱子上，一定要用比例高的甲醇来洗脱？

这个小疑问，希望大家解答下，谢谢
顶部
ns5fan[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 114518
精华 1
积分 416
帖子 510
信誉分 101
可用分 3353
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态 离线
8

发表于 2015-6-23 17:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
梯度洗脱就可以短时间把杂种全部冲干净 能够缩短进样的间隔啊
顶部
xue258[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75643
精华 0
积分 746
帖子 1171
信誉分 100
可用分 6696
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-26
状态 离线
9

发表于 2015-6-23 17:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
如果没有分开：减少甲醇比例，降低流速，或者更换更长的柱子，药典要求的流动相组分是不能变的
如果是上一针的残留：还有你可能冲的时间不够，有残留成分，多冲一段时间看看后面有没有峰

==========================================================================

药典方法是可以做调整的，包括EP，USP等。但是调整不能太大，一般都有一个百分比限制。
顶部
xue258[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75643
精华 0
积分 746
帖子 1171
信誉分 100
可用分 6696
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-26
状态 离线
10

发表于 2015-6-23 17:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢大家帮忙
我把甲醇-水从25:75改成20:80，峰分得很开！

不过我还是不太明白，中药提取物的成分这么复杂，甲醇比例这么低，多冲下，也能把杂质冲出来吗？等梯度甲醇这样跑，基线平了就可以进样吗？
会不会有些成分，用比例低的甲醇冲很久都不会出峰，还吸附在柱子上，一定要用比例高的甲醇来洗脱？

这个小疑问，希望大家解答下，谢谢

=============================================================================================================

中药一般比较毁柱子，关键就因为它成分太多，很多脏东西比较容易吸附在柱填料上洗不下来，所以一般建议每次做完之后，适当转换成全有机相（或者梯度）多洗一会柱子。或者直接一点的办法：配保护柱。
顶部
 12  1/2 12››