食品分析者

我用咔唑比色法测定果胶含量，做标准曲线时，发现沸水浴之后加入咔唑乙醇溶液以后，溶液变成绿色。查了一些资料说可能是铁离子影响掩盖了紫红色的显现，可以考虑用优级纯的浓硫酸。可是换成用优级纯的浓硫酸后还是出现了同样的问题，请大家帮忙找找问题吧，谢谢啦！

你可以微波干燥后称重或者冻干后称重啊，选择醇沉法

多年前我也遇到过这样的问题。为了做这个标准曲线居然用了2周的时间，反复筛选排查后发现，的确是硫酸的问题。
不同厂家生产的硫酸是不同的，同一厂家生产的不同批次的硫酸也是不同的。建议你多找几家、几个批次的硫酸试试。

我没用碰到过 加咔唑前淡淡的红色 加过颜色更深一点而已

我今天刚做，也遇到了楼主同样的问题，不知道是咔唑的问题，还是浓硫酸的问题。不知楼主现在问题解决了没？

一直很奇怪为什么那么多人做果胶用这种方法都测出来了？

我今天又换了另外一个厂家的浓硫酸试了，还是出现绿色的啊。不过我的咔唑是用的国药的化学纯，配制的咔唑溶液也没有精制乙醇。请问你的咔唑是分析纯的吗？

今晚再次看到这个帖子，忍不住翻了一下自己的试验记录本。我是2004年6月份做的这个试验。用硫酸咔唑比色法制作半乳糖醛酸的标准曲线。参考文献是 Bitter T, muir HM. A modified uronic acid carbazole reaction. Analytical Biochemistry, 1962, 4: 330-334.  强烈建议参考该文献进行试验。

我当时用的浓硫酸是 淄博化学试剂厂 的分析纯的。

几个注意的地方：
（1）向试管中先加浓硫酸，再缓慢加入样品，顺序不可颠倒。【这一点与常规的操作方法不一样了】
（2）反应要置于冰水浴中，保证混合液温度不高于室温。
（3）混匀时要缓慢，防止其剧烈放热。
（4）所有混匀均为摇匀，不可将试管反复倒置混匀。

希望能对楼上的几位有所帮助。

浓硫酸换成优级纯就好了，希望对你有用。

开始也是出现绿色（当三价铁离子含量>0.00005Mol/L时会出现绿色），换了一批硫酸还是不行，后来把配试剂的水全换成超纯水之后就可以了。楼主可以把硫酸、水、乙醇都换一下试试，不出现绿色的话线性一般都很好的。