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标题:[未解决]是不是需要经过很多次离心才能浓缩到1mL呢？

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#断点#[使用道具]
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发表于 2015-6-24 18:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

是不是需要经过很多次离心才能浓缩到1mL呢？

今天用超滤管纯化咪唑洗脱下来的蛋白，分子量在45KDa，超滤管用的是3KDa的，转速4000r/min，10min，为什么离心到管底的液体那么少呢？跑过SDS，蛋白浓度较低。是不是需要经过很多次离心才能浓缩到1mL呢？
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疲惫黑眼圈[使用道具]
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发表于 2015-6-24 18:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
要不停的用缓冲液冲洗，建议冲洗5-6次
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艾玛@加油[使用道具]
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发表于 2015-6-24 19:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
是不是离心完成之后，每次只能离心出少量的buffer
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=心晴=[使用道具]
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发表于 2015-6-24 19:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
离心时间太短,转速过低.应该使用30分钟7500rpm.离心时间1到4次,再试一试.超滤管应该使用10KDa的.
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不化妆的lay[使用道具]
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发表于 2015-6-24 19:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
转速过高，不会对膜有损坏吗？
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哦买噶[使用道具]
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发表于 2015-6-24 19:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
每次离心后要反复冲洗几次，得率确实是少
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集贤阁[使用道具]
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发表于 2015-6-24 19:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
有可能是试剂问题 做个空白看一下。
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哈达[使用道具]
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发表于 2015-6-24 19:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不可以，每一瓶的石油醚氧化程度都不一样
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