液质联用

1.M＋和（M＋1）＋的问题

从理论上来讲，ESI在正模式下只会出现加合离子（M＋H、M＋Na等），APCI和APPI可能出现M＋离子，但在实际工作中（LC－MS），却遇到了M＋离子，通过对样品做核磁（H谱），我们发现化合物是没有问题的，而M＋则是在质谱过程中产生的。

我们对照对这些化合物的结构，发现这类问题在化合物的结构上有一些共同之处，就是在结构中含有桥环，且在桥环中有带一个H的氮。

私下里觉得是在电场作用下，桥环中的氮中性丢失质子（H）所产生的，而M＋为（M－H＋1）＋。

2.M＋Na的问题

对于一些样品，只有M＋Ma，而M＋1几乎没有，
该类化合物的特点是，化合物结构中还有多个O和（或）S原子。

我们用的色谱纯的乙腈（Merck），质量上是没的说的，但是，色谱纯的溶剂中仍然还有痕量的碱金属离子，这就是样品处理中没有引入Na盐，而在质谱上为什么会出现＋Na的问题；

由于在化合物中O、S原子还有未配对的孤对电子，而Na离子有没有电子的空轨道，所以O、S特别容易捕获Na离子而形成带电粒子，而但样品还有多个O、S的时候，形成＋Na峰的几率增加，＋H峰的比例逐渐减少甚至消失。

2M峰和双电荷离子

一般样品是出M＋1（23...），随着样品浓度的增加，2M＋1（23...）丰度随之增加，这主要是样品浓度增高时，ESI喷雾时，带电雾滴中样品浓度增大，在后面的库仑爆炸和进一步的去溶剂化过程中，最后两个分子和一个电荷在一起的概率增大造成的。

对于双电荷离子，主要是分子结构中有两个质子化位点，最后两个位点都带了一个电荷，最后形成了双电荷离子。

怎么区别是双电荷，还是2M：

在C13同位素上，双电荷的C12峰和只有1个C13的分子只相差0.5，不是双电荷则相差1；
在分辨率教差的仪器（只要不是号称高分辨率的仪器）上，这两个峰会合并在一起，也就是看不到C13的同位素峰。

补充一点：如果样品出＋Na，那就可能会出现加两个质子，一个质子一个Na，两个Na的情况，那样会出现一组峰：主峰相差11。

在ESI时，喷针和仪器组成了一个原电池，流动相和喷针表面发生电荷转移，使得喷出来的雾滴带电荷，而在喷雾过程的逆流N2的作用下，带电液滴发生一级一级的库仑爆炸（大部分液滴以废液和气态被除去），在最后的去溶剂化后就形成了被检测离子。所以样品只有带电，同时在库仑爆炸中优先激发出来，才能形成检测离子。这主要是考虑的溶剂化学的影响，而且基质的存在很可能会抑止样品的离子化（基质效应）。

而APCI的流动相在喷雾后，流动相被吹干后，样品分子通过电晕放电针来带电荷（另外，还可能发生电荷交换）。电晕放电针的参数对样品电离有影响，而基质效应影响很小。

对于M＋Na的问题，我本人的理解并不认为这些微量的钠离子完全来源于乙腈。

当然不能排除这个来源，可是我觉得很大一部分还是由于在样品处理中引入。很多玻璃容器的内壁溶解出来的金属离子包括钠离子、钾离子都多的很。

同时对于有一定实用时间的仪器系统，体系中残留的这些离子液不可忽视。

这些加合离子的存在常可与M+1峰同时存在，作为判断分子量的有力佐证。

补充：

尽管对于同一种分子，不同的液质仪器系统给出的分子量(结论）一致，但却有可能给出不尽相同的质谱峰。本人曾经用过岛津的2010。这套系统作有机小分子的分析得到M+1峰外，常常都会出现很强的M+ACN+1峰，很多时候甚至强过M+1峰。把干燥气的流量合温度及CDL的温度打高根本不起作用。也许通过调节一些电压参数会降低这种加合离子的存在强度，不过考虑这一加合离子可与M+1配对存在，也就没作进一步的调节。

多种加合离子的存在会给我们的分析带来一定的方便与不便。

1.多种加合离子的存在，可以让我们对于真正的分子量的推测更为有把握。

2.不同种类加合离子的强度反映了体系的一种化学环境。比如反应中用了氨盐，很可能在对反应体系或者产物进行液质分析时会出现(M+NH4)+，即M+18.如果反应体系用了钾盐，那么M+39的峰就会增强。当然存在多种离子时，其加合峰的强度不但与这些残存离子浓度有关，还应该与目标分子的结构特种（包括空间结构），残存离子的半径有关。

3.加合离子的存在会降低液质定量分析的灵敏度，同时本人认为其测量结果的重现性可能也受到一定影响

4.多种加合离子的存在增加了谱图的复杂性，如多肽的分子量测定时，如果仅仅存在加质子峰，不论电荷数多少，结果解释都非常清楚，但一旦多出这些诸如Na+，NH4+，结果的解释就显得麻烦了很多，尤其时肽的分子量越大就越明显。

楼上的回答真是不错！看来要看分析的要求是什么。如果只是测一下分子量，和蛋白质组学，要求大不相同。