液相色谱

关于采用GB 21703—2010乳中苯甲酸测定

1、这个标准用的是单点定量，靠谱不？

2、方法：准确称取3g样品于100mL容量瓶中，加10mL水溶解，再加入25mL、0.1mol/L NaOH溶液混合后置于70℃水浴中处理15min，冷却后用0.5mol/L H2SO4将pH调节到8（用pH试纸），加入92g/L的亚铁氰化钾和183g/L 的乙酸锌溶液各2mL，剧烈振摇，静置15min，混合冷却到室温，再用甲醇定容，静置15min，上清液经过0.45μm过滤膜过滤，滤液即为试样溶液。加NaOH溶液是为了电离出苯甲酸根离子，为何还要加 H2SO4调节pH？

3、这个实验要注意哪几个关键点？

只要样品浓度和标品浓度接近，单点定量很靠谱。
加酸调回来是为了保护柱子，一般反相柱都不耐强碱，而且离子型的苯甲酸在反相柱上也难有保留。
称样和定容是两个关键点，再一个就是可靠的色谱方法。

液相色谱都是单点的！

严格地说，单点定量是不可靠的，但是色谱类的分析，很多都是只用单点进行定量，但作为标准的话，要做系列的标准点。2。色谱柱要在中性条件下使用为好的

这个标准里，NaOH的添加量是不是过高了，加硫酸也是为了中和多余的NaOH吧，而且pH也只是调节到8，是不是沉淀剂也会使pH下降？

能定到方法，说明比较靠谱的，你也可以做方法验证！

1、在相近的范围内，单点是可以接受的。
2、先利用蛋白质的碱变性，破坏蛋白质结构，提取更充分；进样前调整pH值，保证色谱峰型。

你是说加NaOH的目的是吧，一方面是为了电离出苯甲酸根离子，一方面是蛋白质变性？