小中大【转帖】电泳图的Marker阅读要点
最近在做PCR试验,发现要了解的东西太多了,很多非常基础的常识性的知识都很容易出问题,最近就出现电泳图中的Marker问题,一起做试验的前辈教我从最后一条开始数,最后一条为11,代表72bp,前面再类推。按此方法比较一直以为自己没跑出所需条带,降低条件反复跑。
然后坐下来总结经验,终于我认识到可能是Marker的阅读问题,并且在试验中我试着用不同的电泳时间看结果,发现有时候条带总共是10条,有时候是9条。我意识到按照最后一条条带来定位是不准确的。并上网查看Marker说明,发现不同的Marker说明表格显示有的总共11条,有的总共13条。但是在对照图片上可以发现最后的11号或13号甚至12号条带往往光有数据而不显示条带,这说明最后1条条带甚至倒数第二条条带是很难显示的。有时它们在同一个条带上标记两个数据,这是因为如果电泳时间或胶的浓度影响,有时无法分辨为两条。因此,我可以确信,用Marker比较一定要从起始端开始数,而不能根据最末一个条带来定位。拿到足够的证据,同已经做了1年多试验,就要发表文章的前辈讨论,但他仍然坚持自己的看法,说是老师教他的。终于我将这个情况跟技术员及老板讨论,最终获得认同。这样看来,这个问题也不简单。
我曾搜索本站寻求帮助,但无法获得有用的信息。可能大家认为这个问题太简单了,现在发这个帖子希望对初学者有帮助,因为它曾让我这个初学者走弯路。发帖加分受到鼓励,因此再花时间分享心得。