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1)控制乳酸,
首先应考虑葡糖糖的限制性流加策略,即根据细胞的葡萄糖消耗速率进行培养基流加。考虑到葡萄糖浓度控制过低(<1g/L)时,培养基中其他营养成分可能消耗殆尽,一般残糖的控制水平可以控制在2-5g/L左右。
目前商品化的培养基及流加策略,都有可供参考的protocal,可以直接在此基础上进行工艺优化。
文献中报道的乳酸阈值(影响细胞生长、抗体质量的乳酸浓度)58mM,l流加培养操作模式下,一般很少能达到。
其次,细胞培养工艺中pH的控制,对乳酸的生成也有影响。一般情况下,pH控制高,即偏碱的环境是刺激细胞产酸的。所以一般表达重组蛋白的培养工艺中,生产期的pH要控制的偏酸性。
最后,溶氧不足也会造成细胞无氧呼吸,代谢产酸的。
至于报道的使用半乳糖替代葡萄糖,不做推荐。
2) 细胞培养的参考书籍
推荐hu weishou 《Cell Culture Technology for Pharmaceutical and Cell-Based Therapies》google可以查到免费电子版本。