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标题:【求助】这几个抗体相关产品的研发是否有前景

##蒙奇奇[使用道具]
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楼主的转基因鼠抗体分子筛选平台筛出的全人抗体分子还是要交专利费的吧。 另外现在细胞抗体滴度达到5-10g/L也不算太罕见,质量怎样,结构全面确证了没有?
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##蒙奇奇[使用道具]
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项目II中抗体分子与CD20结合部位是否与美罗华相同?美罗华作为一个早期人鼠嵌合抗体还能存在这么多年,其实还是有道理的,不要认为作为做了人源化,或全人抗体或敲除了岩藻糖就一定是一件好事。
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yayya[使用道具]
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再进来叹一下5-10g/L的表达量。一般来讲摇瓶的表达量都会比后期的生产工艺低的,毕竟后期的工艺开发一般都会采用fed培养,细胞的生长周期也会更长,细胞密度也会更大。但是之前的经验是,如果细胞的表达量过高的话,细胞的生长速度会比较慢,产生的蛋白翻译后修饰会不完全。所以筛细细胞株并不是要越高越好,盲目追求表达量的,要综合产品的质量和细胞的生长特性。
其次,细胞株的表达量即使很高对于产品的成本也不会降低太多,后期的蛋白纯化仍然会花费很高。相比较于培养基和培养体系,蛋白纯化的填料更加昂贵。
仍然希望大家来继续讨论,给自主创新项目加油!
......

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的确,抗体的质量才是宗旨,量再高,为了与仿制药一致,多余的酸碱成分在纯化时是被去掉的,同时酸碱成分的增加也会给下游纯化带来负担,我们做的一个项目,放大到50L时,碱性成分变多了,又得摸索除去碱性成分的工艺,纯化填料的确耗钱,1LProtein A十几万;另外,国内能达到5g的应该寥寥无几,还有,5-10g这个范围是不是太大了点。
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除去浓缩补料外,摇瓶培养很大的瓶颈是中后期溶氧跟不上,导致了细胞状态肯定不好。楼主的5-10g/L定量肯定是比较粗略的,精确测表达应该是用HPLC
我特别认同您说的关于“蛋白翻译后修饰”的观点,如果一个细胞蛋白翻译量很大,但内质网、高尔基体的修饰能力有限,会导致胞内聚集未折叠蛋白,太多的话会导致细胞凋亡,而且对下游纯化的压力也很大

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我们做产量分析时HPLC和重力柱都做,然后比较数据。
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dreaming[使用道具]
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这个观点不是很赞同的,首先我们不知道细胞内的内质网、高尔基体的修饰能力到底有多高(细胞株能承受5g/L,10g/L还是20g/L表达?)。具体项目需要具体分析的,质量是第一的前提下能做得更高是一种挑战。
我相信下游纯化压力也许是暂时的,当他以后面临的市场都是10g/L以上我想下游纯化工艺耗材也会做出相应改进的否则可能要被淘汰了。总之我们也需要不断超越

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嗯,确实目前还不能对细胞的修饰能力做定量。我之前听一个从安进回来的大牛说,他在安进做一个单抗项目,悬浮培养,单抗产量能达到20g/L,质量上没有问题。
国内细胞表达水平,与国际顶尖水平还是有一定的距离,任重道远,同志们!
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