细胞世界

忍不住还是要argue一下，虽然说得的确很有道理。
1，反复的洗手加喷酒精，为什么不带乳胶手套？夏天还好，冬天如何？男生皮糙肉厚还好，女生细皮嫩肉如何？不要说乳胶手套贵，比起反复的仍细胞便宜得多。
2，白大褂真的有那么干净吗？我一般都不穿白大褂，尤其夏天，热是其一，没必要是其二，穿白大褂那是为了防护自己。
3，超净台照紫外是步骤一，吹20分钟是步骤二，步骤二的重要性远大于步骤一。
4，说话对细胞培养是没有任何影响的，只要不影响到你的操作。大家一起边做细胞，边聊天，其乐无穷。
5，我倒认为save是做细胞的一条基本原则。至于细胞生长异常要具体问题具体分析，有些细胞你是仍不起的。
呵呵， 尖锐些，别介意。
实验小心一些是好，但不要因而缩手缩脚，会吓走一批人。Tongue
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看到楼主的话我也想这么argue一下
做了这么久细胞，我也有些自己避免污染的经验：
1 不怕花钱，宁可全部用一次性的也不要相信高温高压消毒。
2 不要穿长袖白大褂，胳膊可以洗干净，多喷点酒精，然后为了防止培养细胞用的液体把手弄脏，请戴手套（注意，不是为了防止你污染细胞，而是怕实验药剂伤害你）
3 使用平皿等开盖培养盘培养细胞时，开了盖，手不要在盘上晃来晃去
4 无论是实验时还是实验前用紫外照台子，都请用最大风量吹台子，这样可以防止外界的灰尘进入操作台！
5 拿进操作台的东西最好用酒精喷下或者跟着紫外照下，但是实验前，台子最好越空旷越好，因为吹风会吹得很干净
6 最重要的，不要怕污染，该保存就保存细胞，定期保存细胞一方面节省培养耗材另一方面也是保存实验成果的好方法
7 个人认为，不用点酒精灯。。除非你在实验过程中要用酒精灯考什么东西。我曾经就因为点了酒精灯然后戴橡胶手套的手被点燃。。
以上都是我近一年来做实验积累的经验，不管怎么样，在细胞培养室别人大规模污染的时候我们小组的细胞依然健康茁壮的生长。

没污染过，不知道啥时候开始全实验室污染了支原体，刚刚白搭了2个月，郁闷中
支原体恐怖，大家小心

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这位老师，我一直很好奇支原体污染是怎么样的。可否告诉支原体污染的现象，以及检测方法。谢谢。
另外，用酒精灯烧瓶口起不了什么作用。那点瞬时温度，我觉得不足以烧死细菌。很多瓶口甚至还有残留水珠，那点温度都不至于让水沸腾，如果水里有细菌，能烧死么？养细菌的标准操作，比如接种环，是要烧到变红，而推平板的玻璃三角棒，是要蘸了酒精以后，直接点燃。所以关于酒精灯在养哺乳动物细胞方面的使用，我觉得不是那么重要。

很多实验者都不bother自己洗手，酒精一喷就去实验了。我告诉大家，这极端错误
个人经验是，你仔细洗手比喷酒精效果还好。最好的是肥皂/香皂仔仔细细的洗手，一直到手腕，指甲缝都要洗。洗两遍是一个不错的选择。然后手上喷酒精，
有人穿半截袖的白大褂去做实验，每次我看到都想骂。白大褂袖口要长，最好是袖口扎紧的那种，如果不能的话，把袖口窝向手臂。裸露的手腕部分一定也要喷酒精。戴上手套后手请避免接触工作台外面，如果不得已接触，那再喷酒精。宁可手套酒精味多一些。
拿培养瓶和培养液时候请托下面拿，切忌不要拿瓶颈部位。
每天实验开始时候，超净台/实验间 照20分钟紫外是不错的选择
有一点要注意的是，超净台里面的东西一定要尽量少放。放的越多越容易污染
尽量避免操作时候说话，尤其是严禁细胞房打闹说笑。
每天观察细胞状态，不要总想着save，而是发现细胞不对劲（比如生长缓慢）就立即扔掉。有些（比如支原体）污染，镜检是看不到的，但是细胞的生长异常。所以如果细胞生长异常，那么请扔掉，同时由于支原体空气传播，请检查自己的培养液和培养箱是不是污染。
注意：很多人有个误区，认为进口血清都是贵，其实不然。GIBCO的 NCS，马血清，都比国产的便宜的多，质量好的多。只有FBS才很贵，
很多时候国产血清往往是污染源，所以用国产血清要严格监控状态。
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说说我们实验吧
戴无粉手套，从来不喷酒精，更不用洗手，也不见污染啊。
实验说笑自如，细胞在超净台里呢，有什么影响啊？
最重要的是细胞室里里外外都要干净，我们紫外都照30分钟以上。
我们的实验经验是，国产的四季青血清比进口的GIBCO便宜货好，而且也比它便宜。