细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » 【讨论帖】细胞培养减少污染的小细节

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

标题:【讨论帖】细胞培养减少污染的小细节

youyou99[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75216
精华 0
积分 583
帖子 765
信誉分 100
可用分 4756
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
31
 
这位老师,我一直很好奇支原体污染是怎么样的。可否告诉支原体污染的现象,以及检测方法。谢谢。
另外,用酒精灯烧瓶口起不了什么作用。那点瞬时温度,我觉得不足以烧死细菌。很多瓶口甚至还有残留水珠,那点温度都不至于让水沸腾,如果水里有细菌,能烧死么?养细菌的标准操作,比如接种环,是要烧到变红,而推平板的玻璃三角棒,是要蘸了酒精以后,直接点燃。所以关于酒精灯在养哺乳动物细胞方面的使用,我觉得不是那么重要。

===============================================================================================================

在没有超净台的时代,酒精灯的周围是被认为无菌的,我们的老一辈们就是在这样的环境下做过来的。现今有超净台了,再放入一个酒精灯,被认为是加了一个双保险。关于酒精灯的讨论,本版有很多,甚至好像还有一个精华帖,您可以看看。
我觉得您不能用培养细菌的标准来要求培养细胞过程时的无菌处理,因为细菌的数目不是一个两个数量级的,1个细菌烧一下可能就死了,1000个估计就得多烧几下了。
顶部
qhyu[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77304
精华 0
积分 705
帖子 1049
信誉分 100
可用分 6111
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-15
状态 离线
32
 
开超净台的紫外前先吹几分钟的风效果会更好些的。
顶部
youyou99[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75216
精华 0
积分 583
帖子 765
信誉分 100
可用分 4756
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
33
 

养细胞我认为主要是无菌操作习惯的形成。我们这边的一个老师说过,“能不用手的地方就不用手”很贴切的。习惯好了想污染也难的。
顶部
ha111[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72969
精华 0
积分 821
帖子 1239
信誉分 101
可用分 7048
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-16
状态 离线
34
 
细胞培养和外科手术有类似之处,就是要有严格的无菌观念,这样细胞就不容易污染了。最容易导致污染的是操作者的双手,个人认为不必戴手套,因为操作起来不是很方便,但时刻要保持手的消毒,并避免接触瓶口等部位。另外环境卫生、物品消毒等也要务必注意!
顶部
u234[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77031
精华 0
积分 691
帖子 1081
信誉分 100
可用分 6196
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-12
状态 离线
35
 

学习了 ~
准备东西时齐全一些 万一掉了或者污染了就不能简单烧烧再用
顶部
qqq111[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73201
精华 0
积分 830
帖子 1238
信誉分 101
可用分 7086
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-20
状态 离线
36
 

去细胞室必须穿白大褂,这是态度问题。
传细胞前,培养液,PBS,胰酶的瓶口都要用酒精擦下,台面也要用酒精擦干净。
顶部
gmt[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 117811
精华 0
积分 241
帖子 202
信誉分 100
可用分 1771
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-12-7
状态 离线
37
 

不错,有的很多的细节值得注意
我现在就在国外,也在培养细胞,他们的细胞培养室确实是没有酒精灯的,也没有紫外,只是通风厨一直开着,做实验之前先用酒精擦拭里面的台面,先充分洗手在用酒精擦手,就ok了
真的比国内简单多了,我看过他们老美做实验,在里面边做实验,边聊天,合作普通实验一样,相反是我们这些国内的在里面做实验,就专心的做,从来不聊天,
呵呵,国内养成的习惯
顶部
NBA[使用道具]
五级
Rank: 5Rank: 5


UID 75229
精华 6
积分 2497
帖子 4006
信誉分 114
可用分 20946
专家分 70
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
38
 

好的超净台比什么都可靠!
顶部
dior[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72222
精华 1
积分 582
帖子 819
信誉分 102
可用分 4906
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-6
状态 离线
39
 

细胞污染缺失有时候说不清,可能自己很注意也会污染,而别人感觉随随便便也能做得较好。
我的体会是,操作注意一点防患于未然没什么不好,总比污染了回过头再去纠正手法改变习惯要好得多。
我也贴一点:
无菌操作注意事项:
1.凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用75%酒精擦拭瓶子的外表面。
2.靠近酒精灯火焰操作。
3.器皿使用前必须过火灭菌。
4.继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在高处,使用时仍要过火。
5.各种操作要靠近酒精灯,动作要轻、准确,不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。
6.吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管,防止交叉污染。
顶部
ujne[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 117905
精华 0
积分 359
帖子 377
信誉分 100
可用分 2711
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-12-7
状态 离线
40
 

感谢大家的经验,不管重不重要,注意一下的比较好。
不过我觉得可能也是环境比较重要,我们条件也很简陋,不戴手套,没有酒精灯,我后来连实验服都不穿了,觉得还没自己衣服干净呢。但是我们的细胞间是单独一间,而且就我一个人,想说话也没人。没事用紫外线照照,消毒水消消毒,都两年多了也没出过啥问题。
顶部