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标题:【求助】请高手鉴定破骨细胞

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发表于 2015-7-11 17:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

感谢战友指教！我昨天去书店看了一看，似乎书上写的方法中都会在培养基中加1，25-（OH）2D3诱导了，看样子我需要进一步改进了。还有，你能买得到萘酚AS-BI磷酸钠吗？还是直接使用的TRAP试剂盒呢？是不是医院都会有钢尺锯呢？
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发表于 2015-7-11 17:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

机械长骨分离法得到的成熟的破骨细胞是osteoclast,而通过各种生长因子直接或者间接得到巨噬细胞击落刺激因子或者rankle，从而诱导单核细胞融合形成的多核细胞称为osteoclalstlike cell,这两种细胞都可以对三种鉴定方法显示阳性结果。有师兄告诉我说osteoclastlike cell的某些蛋白质不表达，但是我没有看到相关文献，也没有特意去查找。不知大家对这个问题怎么看？
不好意思，我不知道萘酚AS-BI磷酸钠的用处，也没有购买了。trap染色我打算让别人做了，自己做一下骨吸收实验就好了，trap有专门的试剂盒，但是好像比较贵，可以自己配置，好像也不是特别复杂。
钢尺锯骨科应该有吧。
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发表于 2015-7-11 17:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢战友回复，我现在快被这个实验弄晕了，以前都没接触过，课题设计方面也有些困难。我还想检测m RANKL的表达呢，复杂吗？
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雪原[使用道具]
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发表于 2015-7-11 17:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
是RANKL的mRNA表达，写错了。
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发表于 2015-7-11 17:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

真的吗？那是什么细胞呢？请您指点！急！
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zhezhe[使用道具]
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发表于 2015-7-11 17:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我指的是楼上贴出来的图片．站友的图片中的细胞是破骨细胞，但最好采用ＴＲＡＰ染色，颜色会非常漂亮．
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雪原[使用道具]
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发表于 2015-7-11 17:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

感谢您的建议，我最近在购买AS-BI磷酸盐时遇到问题，买不到，可能要买试剂盒了，对了，您知道怎么卖吗？还有，站友贴出来的图片是我早期作出来的破骨细胞，染色很不成功，但是确实是经过那样变成最后你看到的多核图片的。请继续指教！不胜感谢！我还有很多问题想问您！
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abc816[使用道具]
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发表于 2015-7-11 17:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
照的是两个大气泡
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abc816[使用道具]
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发表于 2015-7-11 17:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
看不清楚是什么细胞．建议采用自制ＴＲＡＰ染液染色，在一般光学显微镜下鉴定．如果有条件，可兼用ＤＡＰＩ对细胞核染色，用荧光显微镜检查．
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abc816[使用道具]
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发表于 2015-7-11 17:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
另外，楼上的照片染上色的细胞不一定是多核，但凭经验应该是破骨细胞．因为osteoclast precusors也表达mature osteoclast的一些specific markers, 比如TRAP.
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