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标题:【求助】请高手鉴定破骨细胞

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谢谢!您说的(1)我有些不同的理解,RANK是破骨细胞的配基,当破骨细胞繁殖时,通过外界物质刺激,特异性的表达RANKL,而成骨细胞中的特异性表达因子是OPG,当OPG表达过多时,会对体系内破骨细胞的RANKL产生拮抗,从而抑制破骨细胞生长。
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首先,破骨细胞是终端细胞,根本不能分裂,就是你说的繁殖.请仔细订正.(前体例外).
其次,破骨细胞不表达RANKL, 只表达RANK, 请再次订正.
最后,一种细胞会分泌许多细胞因子的,分泌osteoprotegerin (OPG)的osteoblasts也同理.(是之成也萧何败也萧何也).
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As i mentioned above, osteoclasts are terminal cells which never proliferate, (except their precursors).
And, there is none RANKL expressed on osteoclasts, except its receptor, RANK.
Osteoblasts not only express RANKL, but also osteoprotegerin (OPG).
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This is the abstract of that paper (I have the full text of this paper too):
"We examined the role of osteopontin (OPN) in the osteoclastogenesis of arthritis using collagen-induced arthritis (CIA). Cells
from arthritic joints of wild-type (OPN +/+) mice spontaneously developed bone-resorbing osteoclast-like cells (OCLs). The cultured
cells showed an enhanced expression of receptor activator of nuclear factor jB ligand (RANKL) and a decreased expression of
osteoprotegerin (OPG). The addition of OPG reduced the number of OCLs, indicating that the osteoclastogenesis depends on the
RANK/RANKL/OPG system. The cells also produced OPN abundantly and anti-OPN neutralizing antibodies suppressed the
development of OCLs. Moreover, the addition of OPN increased the expression of RANKL and augmented differentiation of OCLs
from OPN-deficient (OPN )/)) cells. OPN, like the combination of 1a,25-dihydroxyvitamin D3 and dexamethasone, also enhanced
the RANKL expression and decreased OPG expression in a stromal cell line, ST2. These results suggest that OPN acts as a positive
regulator in the osteoclastogenesis of arthritis through the RANK/RANKL/OPG system.
 2004 Elsevier Inc. All rights reserved."
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如果你详细看看上边摘要,就知道在这句话中:"The cultured
cells showed an enhanced expression of receptor activator of nuclear factor jB ligand (RANKL) and a decreased expression of
osteoprotegerin (OPG).","the cultured cells" 没有说是破骨细胞.
如果你再去读该文章的813页,你就彻底明白了:OPN enhances the RANKL expression and suppresses the OPG expression on stromal cells:
Because the harvested cells from joints were a heterogeneous
mixture of cells derived from multiple sources,
such as stromal cells, osteoclast precursors, and lymphocytes,
etc., there are limitations in evaluating mRNA
expression. To clarify the effect of OPN on the expression
of RANKL and OPG, we used a murine stromal
cell line, ST2. As positive control, we used 1,25(OH)2D3
and Dex, which are well-known agents that induce
stromal cells to express RANKL and reduce their expression
of OPG [3,4,8,12,19]. While the combination of.....
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看样子,我还需要进一步研读一下文章,感谢您提出的建议。
我还想请问有关MTT试验,用胰蛋白酶能将贴壁的破骨细胞消化下来吗?浓度多少?多长时间?要不要细胞刮刀?
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这里有人用 raw cell + rankl + M-csf 诱导法 make 破骨细胞么?
你们的 两个细胞因子的浓度如何?
要几天才能长出来?
再问 氧过 破骨细胞 的 前辈们, 最后的破骨细胞的 比率有多大? 那些破骨细胞 大多是 几个核的??
万分感谢!!
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QUOTE:
原帖由 langlang 于 2015-7-11 17:53 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

这里有人用 raw cell + rankl + M-csf 诱导法 make 破骨细胞么?
你们的 两个细胞因子的浓度如何?
要几天才能长出来?
再问 氧过 破骨细胞 的 前辈们, 最后的破骨细胞的 比率有多大? 那些破骨细胞 大多是 几个核的??
万分感 ...

相关疾病:
先天性卵巢发育不全综合征

RAW264.7 cells were first used by Hsu et al to generate osteoclasts in vitro (Proc. Natl. Acad. Sci. USA, Vol. 96, pp. 3540–3545, March 1999), and this method is widly used. By using this approach, I myself can produce osteoclasts with more than a hundred nuclei. I remind of you that, do not like primary cells, you do not need to use M-CSF in this model. sRANKL alone is enough.
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前辈,
真的难以想象 还能形成多于100核的 osteoclast. 那么你开始 时候的 细胞密度是多少的时候 加的cytokine? 1*10^6/well?
再次感谢
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langlang[使用道具]
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不好意思 再问一句
几天能形成osteoclast阿?
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