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标题:【求助】请教一下各位高手蛋白质的大小怎么求

小熊妮妮[使用道具]
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【求助】请教一下各位高手蛋白质的大小怎么求

请教一下各位高手蛋白质的大小怎么求?已知该蛋白质的长为1389aa,相对分子质量为114718.07m.w.,怎么转化成多少KD啊?有的人说,用1389/3*110,还有的人说114718.07/1000及转换成KD。可是为什么两个计算方法的结果不一样呢?希望各位大侠指点迷津!!
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女儿情[使用道具]
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【回复】

是可以用来计算分子量和等电点 前体是你必须知道全基因或者全氨基酸的序列
用1389/3*110  是根据氨基酸的量来算平均分子量
114718.07/1000及转换成KD 是相对精确的算法,但也还算是平均分子量
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rrra6[使用道具]
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【回复】

用1389/3*110方法算最后结果约为51KD,而用114718.07/1000方法算结果约为115KD,其实我最不明白的是为什么两种算法差值会有这么大。还有一个就是做完western blot 之后跑的胶都能分别看到这两个大小的泳道,所以我就不知道我的蛋白大小到底应该是哪个。谢谢!!麻烦帮忙解答一下!
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jishiben[使用道具]
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【回复】

第一种计算方法应该是一种采用平均值的近似计算,但是计算时似乎错了一点儿问题,根据楼主帖中的介绍“已知该蛋白质的长为1389aa,相对分子质量为114718.07m.w.",考虑到20种氨基酸得平均分子量及某些氨基酸在蛋白中的出现概率,在计算蛋白的相对分子量是可近似认为1个氨基酸是110Da,那么1389个氨基酸应该近似为1389*110=152790,即近似为152kD。楼主给出的计算公式好像是认为该蛋白质的编码序列为1389bp,那么除以3得到氨基酸数。但是既然是平均,那么具体的蛋白质中各氨基酸的含量就会与平均值出现差别,因此该值仅作不知道序列时的参考。
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【回复】

楼主给出的第二个数值,应该是使用一些软件计算出的分子量吧。已知道蛋白质的氨基酸序列的情况下,那么该蛋白质的分子式是可以写出的,从而计算出准确的分子量。如果楼主给的第二个数值来源于此,那么该值是可信的。
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蓝色雨梦[使用道具]
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【回复】

Western Blot在115kD和51kD均出现条带,不知道楼主使用的什么材料来做的。楼主可以考虑一下几方面,如果是原核表达/体外纯化,是不是该蛋白质在表达过程中由于稀有密码子问题出现截短表达,或纯化过程中存在降解,115kD已经不小了,存在境界的可能性还是很大的。
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n111[使用道具]
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【回复】

如果是体内材料来做的话,考虑是不是该材料在体内本身就存在两种不同的形式,来行使不同的功能。
希望对楼主有所帮助。
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