PCR仪

还有就是这样设计出来的引物是适合所有PCR吗？实时定量？半定量？
我要做半定量的

我也觉得设计出来的引物特异性比较高，但是有一个问题就是产物片段都是四五千，这样子的话是不是不能P出来啊？？怎样才能比较好的控制产物的长度呢？？上面都没有怎么说清楚？

你好！上面的结果在第二步中没点yes得到的，点过yes就得到下面的结果，请帮忙分析一下，怎么改参数，谢谢！
Primers for PCR

There were 4 forward primers in the valid range for GC content.
There were 4 reverse primers in the valid range for GC content.
There were 1 forward primers in the valid range for melting temperature.
There were 0 reverse primers in the valid range for melting temperature.

ERROR
The Tm range was too stringent, no primers were found in that range

如果做点突变的引物用这个设计可以吗？
如果设计的引物过长，要如何修改变短呢？
谢谢

有些ＧＣ含量是不是太低了啊

可是有一个问题，就是PCR产物的长度没有办法设定，请赐教！