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标题:RT-PCR摸索条件个人经验总结[转自 丁香园论坛]

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发表于 2011-8-20 12:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
如下~~~~~~~~~~~~~~~：

若没有目的条带，调整引物的量、模板的量、镁离子纯属瞎闹。

那弥散带很严重怎么解决呢


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2011-8-20 12:09
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发表于 2011-8-20 12:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我最近也遇到这种问题，以前可以扩出的条带现在扩不出来了，就像上面的图，因为该cDNA可以扩出其他片段，所以考虑应该不是RNA，cDNA的问题，酶也试了三种，结果一样，现在不清楚到底哪个环节出了问题，主要是以前扩出来过，现在怎么也扩不出了
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发表于 2011-8-20 12:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
很有指导意义，谢谢楼主
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发表于 2011-8-20 12:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
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发表于 2011-8-20 12:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请教楼主：你P的片段是多大的？我做的是5、6kb的片段，但是条带模糊，有非特异性扩增，这如何解决？
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