小中大目的条带有好几个是条带中间有一个空洞，反正就是像被中间挖了一块一样，到底是怎么回事啊!^ _^
但反复作还是一样。后来一个师兄说我的看家基因上样量大了，目的条带上样量少了，照此作还是没有改观。有人说是缓冲液的问题(跑出弓形的条带好像是电压高所致)，于是我换了缓冲液，也换了窄梳子，好像有上改观，但仔细看，看家基因还是有弓形的影子，而目的条带也隐约还有空洞。
再请问我下一步该如何作。
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也是新手，讨论一下，个人认为楼主主要要改善的是操作的熟练和准确性
1楼主配胶似乎没有问题，倒胶温度可以掌握在50、60度，注意的是不要混有杂质，看家基因有弓形的影子，是否很亮，即是否与表达丰度有关？减少一下看家基因的模板量试试。
2至于“目的条带有好几个是条带中间有一个空洞”，您加样时是否枪头将胶给捅破了？操作时注意一下，加样尽量垂直，不要把枪头进孔太深。
个人意见，仅供参考！
