求助：Taqman 探针 PCR 扩增曲线 - 经验共享

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标题:求助：Taqman 探针 PCR 扩增曲线

饭团团[使用道具]
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发表于 2011-8-23 12:19 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我们实验室的同学，都是用的5ul体系。下面那个图就是其他同学做的，同一个位点。我也怀疑和我的操作有关系，可是就加样那几步，我实在想不出问题出在哪。。。我也用的ABI7500

ABI公司的探针一个3000多~我也没用出啥好来。。。。。。

阿拉蕾[使用道具]
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发表于 2011-8-23 12:20 资料个人空间短消息加为好友

小中大

5ul的体系，我觉得实在太省了。至少也要20吧。扩增过程中蒸发都要多少?5ul出来的结果能准确吗？

细水长流[使用道具]
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发表于 2011-8-23 12:20 资料个人空间短消息加为好友

小中大

如果你觉得ROX信号太高的话，你反应体系中少加点ROX就行了，我就是这样做的，我将反应体系的ROX浓度降到0.25X，效果还更好，你也可试试，另做SNP分型应是用MGB探针的吧，这家公司探针合成性价比较高，4000元/两条，保证质量，我也是它那合成的，cuturl('www.rainbio.com')。

小荷尖尖[使用道具]
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发表于 2011-8-23 12:21 资料个人空间短消息加为好友

小中大

5ul体系太小了，很容易产生误差，建议加大体系实施。ABI质量还是不错的。

饭团团[使用道具]
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发表于 2011-8-23 12:21 资料个人空间短消息加为好友

小中大

嗯，我们实验室的人，都是用的5ul。结果都还好~

另外，我找到我的原因了，是因为马虎~~~~~加错浓度了。。。。真羞愧啊~~~

给你附张我今天做的