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标题:有做LAMP环介恒温扩增反应的吗？希望可以交流

椰子叶子[使用道具]
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发表于 2011-8-23 12:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢mylab答复啊，呵呵，我这个星期开始做，之前用PCR进行比较，PCR太容易污染了，加样我都跑到其他的房间里去还是不能避免污染，现在PCR老出一条比目的条带大很多的条带（刚开始半个月都只出目的条带，结果哭，没照相），排除了n多原因，都找不到正确原因，痛苦啊
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阿福[使用道具]
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发表于 2011-8-23 12:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
PCR如果出一条比目的条带大很多的条带，那就不一定是污染的问题。
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大猫[使用道具]
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发表于 2011-8-23 12:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
lamp的一个好网站,可以去看看.通过real-time 比浊仪,或者sybr-greenI可以定量.
cuturl('http://loopamp.eiken.co.jp/')
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发表于 2011-8-23 12:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
因为在LAMP反应的过程中，会形成焦磷酸镁沉淀，肉眼观察是白色的混浊物，所以可以通过肉眼观察来判定是否发生扩增反应。
其次，我也在文献上看见有关添加SYBR Green I的报道，“添加稀释过的SYBR Green I到LAMP反应体系中，通过观察反应液中荧光强度变化来判断产物的产生，结果发现，反应结束时混合液的颜色由橙色变为绿色，而且伴有白色沉淀产生。”（文献中的原话）
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发表于 2011-8-23 12:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我想问一下您用的引物是用什么软件设计的啊?还有在做LAMP的时候,在优化的时候,都需要优化什么条件啊?谢谢!
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花裙子[使用道具]
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发表于 2011-8-23 12:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
最近在做lamp，实验结果可以用电泳检测得到，想试一下用SYBR Green I，请问如何使用？
用多少倍的dye？ dye该如何保存？
没用过SYBR Green I，所以请大家多多指教.
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假小子[使用道具]
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发表于 2011-8-23 12:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
有没有用羟基萘酚蓝显色的，讨论一下？
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