最近用紫外可见分光光度计同时测量三种物质的含量，打算采用双波长法测定，三种物质的标准曲线均已测得，请问如何用计算机筛选最佳波长对？有专门的软件吗？这三种物质的标准曲线分别为Y1=.0075+.0001.Y2=.006X+.00008.Y3=.0066X+.0001.麻烦大家指点一下，谢谢

[ 本帖最后由 miracle 于 2011-8-24 15:41 编辑 ]

我认为你采用的方法有问题，你检测波长都没确定，做的又是哪个波长的标线？
比较三种物质的光谱图，看是否存在使用双波长法甚至单波长就能搞定的可能！
把三种物质光谱图传上来，大家帮你分析分析。

不是紫外分光光度计都可以测吗？？

一般是根据几个物质的光谱曲线来选波长的，你把三个物质的光谱曲线发过来，看过之后，再确定波长的选择，我们不用软件，而是根据常识和原则来选。双波长法可以解方程组的方法来测（同时解出几个成分的浓度，但前提是它们的A-C关系应该尽可能满足L-B定律，正比关系），也可以用等吸光点的方法来定波长（用二波长下的A值之差来扣除另一个或两个物质的干扰），你把光谱曲线发过来（zlhuang0132@139.com），我帮你看看后给你个建议。

从理论上讲，三种物质或者更多种物质都是可以测试的，但是就比较复杂，误差也会大很多的，对于两种物质的测试比较常见。

谢谢您的意见，我现在是想问下双波长测量的误差有多大？现在用双波长测量发文章好发不？这三个测量波长分别为，426，418，415

谢谢您的意见，我现在是想问下双波长测量的误差有多大？现在用双波长测量发文章好发不？这三个测量波长分别为，426，418，415

谢谢您的意见，我现在是想问下双波长测量的误差有多大？现在用双波长测量发文章好发不？这三个测量波长分别为，426，418，415

　　1、三个物质的光谱基本重在一起，也可以用等吸光点法来选择波长，但需要用解方程方法来求解三个物质的浓度(只有两个物质时可以用等吸光点法来扣除另一物质及背景干扰，用差量法计算，有三个及以上物质时，至少有一种物质可以用单波长法来测定才方便用等吸光点法来差量法测定。)

　　2、你应该扫描出200-300nm波段的曲线，我看A1和21曲线还在升呀(11应该没有吸收了)，应该还有吸收峰，你扫出来后看看，说不定可以直接用等吸光点-双波长法测定，不必解方程的。

　　3、在定量测定时，浓度应该控制高一些，保持总A在0.2-0.8之间，这样可以控制测定误差不要大。

　　4、你给出了A1、11、21的标准曲线，X与Y是如何对应吸光度A和浓度C的?我需要判断你的公式中的截距在通常情况下是否可省略，如果截距值相对于含X项的值不能省略，那么你做三元线性方程组求解时，就不能直接用教科书上给出的公式，需要略作推导，因为有三个常数项要参加计算。

　　还有一点要说明：测定的波长不同，同一物质的标准曲线方程也不同。因为波长变了，摩尔吸光系数也改变了，标准曲线的斜率、截距也随之变化。所以，用解方程法求解时，指定三个波长来测定，标准曲线方程的截距就不一定是你给出的了，需要重新测定。

　　三个以上的物质浓度测定如果不作掩蔽、分离处理，数学处理过程会略为复杂一些。