准备用反相填料柱层析脱色素，需要注意哪些东西？

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标题:[未解决]准备用反相填料柱层析脱色素，需要注意哪些东西？

[未解决]本主题悬赏可用分 10

smmdcryctc[使用道具]
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发表于 2011-8-26 10:16 资料个人空间短消息加为好友

小中大

硅胶柱层析后，我准备用反相填料柱层析脱色素，但不知道需要注意哪些东西，求大侠帮助一下哈？

我的反相填料预处理是直接在纯甲醇里浸泡的，直接上柱吗？样品怎样上柱？甲醇-水系统，需要梯度洗脱吗？还有我们没有反相硅胶板，你们怎么样确定洗脱剂的比例，甲醇-水系统？

谢谢大家啦

sseia42[使用道具]
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发表于 2011-8-27 15:39 资料个人空间短消息加为好友

小中大

应该可以直接上柱的，装柱应均匀压实了。柱装好后加样液，再加洗脱液。如果是多种色素，可用梯度洗脱，单一色素就不必了。洗脱液组成比例可以查查参考文献，再自己摸索一下。

maicaixiaogu[使用道具]
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发表于 2011-8-27 15:39 资料个人空间短消息加为好友

小中大

可以直接将材料用甲醇浸泡后湿法装柱，装好后，反复用甲醇冲洗，平衡好后，在将柱内溶剂用水替代，当甲醇全部替代出来后，就可以上样了啊，也是湿法上样，样品使用尽量少得溶剂溶解，上好后，挂在柱上十来分钟，就可以用甲醇-水梯度洗脱了，如果无法确定极性，你可以从10%的甲醇-水开始梯度慢慢洗脱，不过这样比较耗时间啊

redwang8181[使用道具]
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发表于 2011-8-27 15:39 资料个人空间短消息加为好友

小中大

说到这个问题我也有一个问题请教我用反相硅胶时就用甲醇浸泡了下就直接装柱上样了结果冲下来很多白色的像脂肪一样的固体但点板没有点不知道你们有没有遇到过这种情况是怎么回事呢？

maicaixiaogu[使用道具]
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发表于 2011-8-27 15:40 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我觉得可能是材料有点问题啊

QUOTE:

原帖由 redwang8181 于 2011-8-27 15:39 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
说到这个问题我也有一个问题请教我用反相硅胶时就用甲醇浸泡了下就直接装柱上样了结果冲下来很多白色的像脂肪一样的固体但点板没有点不知道你们有没有遇到过这种情况是怎么回事呢？ ...

考研吧[使用道具]
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发表于 2011-8-27 15:41 资料个人空间短消息加为好友

小中大

这是填料没有冲干净
装柱的时候好好用纯甲醇多洗洗

kflsjjfdl[使用道具]
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发表于 2011-8-29 09:42 资料个人空间短消息加为好友

小中大

装柱梯度洗脱~~~湿法上样，除色素还是MCI好些吧