色谱爱好者之家

请教各位大侠，用甲醇：磷酸盐缓冲液等度测完样后如何冲洗柱子？

先用大比例水冲洗，有时间的话就慢慢过度到高有机相就可以了！

如使用缓冲盐体系，则需先用甲醇：水 = 5：95作为流动相（准备过程见5.2），1.0 ml/min，冲柱至少1h；然后缓慢降低流速，同时增加甲醇比例不断冲洗，直到增加到流动相为100%甲醇时，便可关闭泵电源，完成关机操作。注意，关机时，确保系统尤其是色谱柱中充满甲醇，以防止微生物的生长。同时缓冲盐应及时处理，不可放置于溶剂瓶中，以免微生物滋生。

甲醇：水 = 5：95，不需要冲洗1h那么久吧，对柱子有一定的损伤的，大概20~30min就可以了，然后梯度冲洗，最后用100%的甲醇保存柱子就OK了

10%甲醇0.8流速洗1h，然后梯度转换为80%甲醇冲洗30min，保存于80%甲醇中，原则上是冲洗20-30倍柱体积。看柱子长短和你的流动相比例采取不同的洗脱时间。

同等比例的甲醇：水冲三四个小时，然后用纯甲醇充满柱子。

先用 甲醇—水(10:90/5:95)，再用 单一的 高纯水冲洗

觉得不妥，首先要用含水比例大的流动相冲，目的是冲掉有机盐，由于很多柱子用高纯水冲时会引起柱效下降，所以要加少许有机相

而先用5%-10%的甲醇已经可以达到冲有机盐的目的，再用高纯水，已无必要，而且还有降低柱效的可能

同意楼上的意见.

我们这做完就先用水冲,在换成乙腈或甲醇保存的,不过我在有的资料上也听说:如果用高纯水冲洗,对柱子不太好。

最好别用纯水冲柱子,WATERS的好吧?我也用坏了两根了,跟用纯水冲有一定关系!

从ODS柱的原理着手,应该先用稍底浓度的强洗脱剂(甲醇或者你所用的别的如乙腈,当然最好是和流动相里的强剂是一致的)淋洗15分钟左右,然后换成半数比的 水:甲醇(乙腈),最后用纯强剂保护柱子

最好不要用高纯水冲

因为冲的时候回有沉淀生存啊

这样对柱子影响较大啊，还可能会把柱子堵了啊

用高纯水洗不妥，纯水冲洗色谱柱会造成柱床的塌陷，会影响柱效！