【求助】全血基因组DNA提取问题 - 经验共享

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标题:【求助】全血基因组DNA提取问题

bgf5[使用道具]
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发表于 2015-8-1 18:17 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我的试验做完了，我最终是采用了园子里战友的建议老老实实的用苯酚-氯仿提的DNA，效果相当好，做出来的PCR也很好！所以请大家不要盲目相信什么试剂盒了！浪费金钱，浪费时间，浪费感情！现将我用的方法上传，希望对师弟师妹们有所帮助。我的一些建议都以绿色笔标出。

ukonptp[使用道具]
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发表于 2015-8-1 18:18 资料个人空间短消息加为好友

小中大

建议您用碘化钾的方法提取外周血DNA，这个方法简便、快速、经济，我实验了几次，结果比较理想。

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我试过几次，不是很理想啊！你能把你的详细步骤发给我吗？我为什么提的DNA 里老有黄色的杂质，是碘化钾分解的碘吗？不过，倒是很方便快捷啊！

dhpbj[使用道具]
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发表于 2015-8-1 18:18 资料个人空间短消息加为好友

小中大

可是要用5ML血提的话KI方法就很繁琐了啊！
最近也在用酚氯仿法提DNA，可不是没结果就是产量特别少，我做了好多次了，不知道是什么原因，很崩溃，哪位前辈可以帮帮我吗？

iii_ii[使用道具]
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发表于 2015-8-1 18:19 资料个人空间短消息加为好友

小中大

不要低估盒子，有些问题还是操作的问题。
整个基因组在吸附柱洗脱很难，需要很长时间。酚氯仿提取法，不用洗脱，加水直接溶解。
采取吸附柱，需要把基因组打碎成片断，才容易洗脱。柱提，纯净，含杂质少，不影响后续操作，是其优势。
推荐一款不用蛋白酶K的快提方法，20分钟提取高纯度的基因组DNA
cuturl('http://www.galaxybio.net/NewsShow.asp?id=26895')

greenbee[使用道具]
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发表于 2015-8-1 18:19 资料个人空间短消息加为好友

小中大

按你们的方法做出来了，呵呵

zhihui小新[使用道具]
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发表于 2015-8-1 18:19 资料个人空间短消息加为好友

小中大

这么简单的实验就是不买盒子也能做的很好~

chengjie79[使用道具]
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