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十分感谢楼上的回复,不过本人比较笨,我想问一下,加酶切位点能加几个啊,还有比如说我的引物是,上游引物5‘ AGCTGCAGGTCCTGAGC 3',下游引物是5’ TTCGCAGTCATGGCCTTAG 3',我想要加EcoR1的酶切位点,我的最终引物应该是什么样子的,还有引物会不会过长,加入酶切位点的引物P出来的结果是不是不好啊,容易出现非特异性的扩增产物吗。
还有这个酶切位点加在了我的最终目的基因的哪个部分,我的目的基因两端都可以加酶切位点吗?
希望大家多多帮忙,本人实在是太菜了,十分感谢大家,小人不胜感激