PCR仪

谢谢楼主的分析！！！
我这个试剂盒中没有对照，里面只有四种试剂，其中两种粉剂，一种吸附剂，我按说明书说得在50度下修饰16个小时后用5微升的吸附剂吸附，吸附以后要反复用酒精洗涤，10000转1分钟离心震荡，您上面说要避免剧烈吹打震荡，我想吸附以后是不是就可以离心震荡，否则离心后的吸附剂很难有效洗涤。
我做得确实就是MSP，有甲基化和非甲基化两种引物，每种引物的退伙温度确实是差这么多，我就是取得他的平均值，跟参考的文献差不多。
我的目的片断是347大。您说的修饰后纯化回收是不是说的修饰后怎么从吸附剂里把基因洗脱下来，我是按照说明书用PH值7.5的TE液，50到60度15分钟，然后高速离心，其中有多少丢失就不知道了。
我的基因提取是用试剂盒提取的，量和纯度都是挺好的，我加了20微升的基因，自我感觉量还可以。
非常感激楼主的解释，我做实验完全是个菜鸟，希望多多帮忙。

谢谢楼主的分析！！！
我这个试剂盒中没有对照，里面只有四种试剂，其中两种粉剂，一种吸附剂，我按说明书说得在50度下修饰16个小时后用5微升的吸附剂吸附，吸附以后要反复用酒精洗涤，10000转1分钟离心震荡，您上面说要避免剧烈吹打震荡，我想吸附以后是不是就可以离心震荡，否则离心后的吸附剂很难有效洗涤。
我做得确实就是MSP，有甲基化和非甲基化两种引物，每种引物的退伙温度确实是差这么多，我就是取得他的平均值，跟参考的文献差不多。
我的目的片断是347大。您说的修饰后纯化回收是不是说的修饰后怎么从吸附剂里把基因洗脱下来，我是按照说明书用PH值7.5的TE液，50到60度15分钟，然后高速离心，其中有多少丢失就不知道了。
我的基因提取是用试剂盒提取的，量和纯度都是挺好的，我加了20微升的基因，自我感觉量还可以。
非常感激楼主的解释，我做实验完全是个菜鸟，希望多多帮忙。

这里用Epigentek 的 Modification kit，因为，做了不同的sample， 所以，不知道甲基化率怎么样。但是real time 已经做出几个primer的了，只是ct值很靠后（31-35之间），跟一般的DNA不一样，不知道这是不是MSP的特点呢？