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标题:甲基化检测方法（亚硫酸氢盐修饰后测序法）

橘子水儿[使用道具]
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发表于 2011-9-2 15:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
msp的巢式PCR第一轮外侧引物怎么设计啊
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如影随形[使用道具]
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发表于 2011-9-2 15:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
急需阳性对照制作文献，盼各位提供，在这里谢过了
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冰激凌小姐[使用道具]
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发表于 2011-9-2 15:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢楼主开辟此贴，我在接近绝望中P出了M带。
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大仙[使用道具]
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发表于 2011-9-2 15:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
您指用人血制作IVD 吗？
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发表于 2011-9-2 15:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
各位大哥：我想请教一个问题，我做的是MSP，在文献上查到引物，文献上就说是启动子区甲基化的引物，我说按文献上的做了，条带也出了，但是我现在把引物放到Methyl Primer Express里对照，怎么查出来是在第一外显子上呢？真晕了，难道外显子也发生甲基化吗？
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嘉年华[使用道具]
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发表于 2011-9-2 15:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请问楼主，为什么纯化回收后过夜没有沉淀呢？我没用糖原，是不是不用糖原就不会产生沉淀？
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飞天小鹿[使用道具]
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发表于 2011-9-2 15:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我是新手，现在想要做miRNA的MSP,请问也是先提取DNA吗？引物也没有查到文献，也是按照DNA设计引物的软件吗？试剂也还没有买，大概要买哪些试剂盒啊？非常感谢高手能指点
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麻瓜[使用道具]
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发表于 2011-9-2 15:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
各位师兄师姐：我想请教个问题，MS-HRM中标准曲线是怎样制作？见一些文献写到用一个甲基化程度100%和0%的标准品，按不同的比例配成0%，1%，5%，10%，20%，40%，60%，80，100%。这样梯度的标准品。但有些用到的标准品序列与待测序列不是同一个序列。如果标准品与待测序列不是同一序列,那序列本来就不一致怎能说明是由于甲基化的不同经盐修饰后的序列改变?
谢谢各位大哥大姐指教！
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嗨皮[使用道具]
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发表于 2011-9-2 15:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
MS-SSCA甲基化与否经亚硫酸氢盐修饰后，转为序列的不同，从而在聚丙酰氨凝胶中的位置不同，甲基化与非甲基化DNA的两条链经变性后出现两条带，而部分甲基化的为什么会出现三条带呢？谢谢指教！
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白鸟之翼[使用道具]
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发表于 2011-9-2 15:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请教各位老师，我用的zymo的甲基化试剂盒，修饰后的DNA电泳没有条带，不知道是加入的DNA 量少还是修饰的过程中降解过多。请问有没有用过这个试剂盒的同学，请教一下，不胜感激！！！
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