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标题:【求助】细胞株筛选平台优化

bohe221[使用道具]
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发表于 2015-8-6 17:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】细胞株筛选平台优化


大家在做细胞株构建时（cho cell）,一般都用的是那个公司提供的平台？比如invitrogene的chos 和DG44，还是sigma的GS_CHO还是lonza或者别的公司的？大家买回来细胞和载体后，一般都对载体和细胞做了那些优化？对筛选策略做了那些调整？说具体点，不要说些纲领性的空话，要确实有效果的优化。比如对invitrogen提供的pcho1.0载体启动子做了那些变化，筛选标记做了那些变化，取得了什么效果？
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KGZ564[使用道具]
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发表于 2015-8-6 17:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我看一般用invitrogen的比较多 至于载体优化 这个一般是研究机密吧 希望大牛出来讲讲 分享一下 果断mark
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u234[使用道具]
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发表于 2015-8-6 17:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

有人在用sigma SAFC的CHOZN系统吗
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qianqin1977[使用道具]
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发表于 2015-8-6 17:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 u234 于 2015-8-6 17:53 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

有人在用sigma SAFC的CHOZN系统吗

前面在新闻中看到过，貌似今年sigma重点推出的系统之一。
据说是目前唯一一个能在加压筛选系统内做定向插入的，不知道怎么去实现的
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jude[使用道具]
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发表于 2015-8-6 17:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

锌指核酸酶敲除GS基因，然后MSX-free。
据说不少人感兴趣
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dior[使用道具]
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发表于 2015-8-6 17:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

商业化的DHFR质粒 可否推荐几个？
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S6044[使用道具]
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发表于 2015-8-6 17:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

Lonza GS大致怎么收费的呢，有朋友了解吗，Thanks
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jude[使用道具]
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发表于 2015-8-6 17:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

因为专利问题，用invitrogen DG44的比较多。
提高表达量的方法只说一点：密码子优化的比较常用，改造载体的比较麻烦和不确定。
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dior[使用道具]
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发表于 2015-8-6 17:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 jude 于 2015-8-6 17:56 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

因为专利问题，用invitrogen DG44的比较多。
提高表达量的方法只说一点：密码子优化的比较常用，改造载体的比较麻烦和不确定。

好像密码子优化在CHO细胞里作用比较有限吧（个人听说），不知层主的观点是来自实践还是文献？
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dog002[使用道具]
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发表于 2015-8-6 17:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

只实践过这个，因为比较简单，不同的表达量还是差别很大。
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