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标题:【求助】大牛们说一说单抗药宿主蛋白检测的事吧

hustwb[使用道具]
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发表于 2015-8-6 18:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】大牛们说一说单抗药宿主蛋白检测的事吧


跟一个老师聊天，讲到了FDA要求在临床三期的时候需要自己开发宿主蛋白的检测试剂盒，而试剂盒的开发主要有两种方案，一种是将空细胞按照已定的生产工艺进行发酵和纯化，然后将获得的东西免疫动物制备抗体。还有一种就是将工艺获得原液去除抗体后再免疫动物，好像目前做这个工作的公司只有一家。感觉着两种方法理论可行，实际上操作很难，要做多少才能收集足够多的样品来做抗原呢？
不知各位业界资深专家有何看法？
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whitesheep[使用道具]
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发表于 2015-8-6 18:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
同关注。不过话说，现在国际上有能力自己开发宿主蛋白的检测试剂盒的，也就那寥寥几家吧
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vvmmoy[使用道具]
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发表于 2015-8-6 18:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这不用自己开发吧，一般只要你用的宿主细胞不是太另类，都应该可以买到商业化的吧
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qhyu[使用道具]
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发表于 2015-8-6 18:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

从重组蛋白开始，国内一直都用商业化试剂盒，没听说还要自己做的。如果这样搞，又得加一层验证工序，不太靠谱吧
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okhaha[使用道具]
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发表于 2015-8-6 18:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这两年waters在推2D LC-MS 来测HCP，不知道是否有企业这么做的
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ns5fan[使用道具]
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发表于 2015-8-6 18:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

前期可以用商业化试剂盒的，临床三期的时候就需要自己的试剂盒了，因为基本上那个时候生产工艺已经确定了吧。
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greenbee[使用道具]
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 小中大

昨天也听说这个了，自己制备抗体挺困难的，企业难度又加大了
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ldh[使用道具]
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发表于 2015-8-6 18:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

感觉要将原液中的抗体完全去除很难？再说谁又能保证在去除过程中，不会去除部分性质想似的宿主蛋白？前一个问题会导致所制备的宿主蛋白抗体可能存在一定的交叉反应（与目标单抗发生反应）；而后一个问题可能就会导致所制备的抗体不会识别部分宿主蛋白。对了，我也想问一个问题，表达细胞与空细胞之间的宿主蛋白（胞内或胞外上清）差异大吗？如差异小，是不是可以接受楼主所说的第一种方法用空细胞。如差异大，是不是意味着只能选择表达细胞呢？如何评价，如何选择？还得请楼主给点指示，谢谢
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qianqin1977[使用道具]
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发表于 2015-8-6 18:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 okhaha 于 2015-8-6 18:11 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

这两年waters在推2D LC-MS 来测HCP，不知道是否有企业这么做的

“2D LC-MS 来测HCP”，目前还不是FDA, ICH推荐/要求的技术，但是安进已经多篇文章发表了，我恰好最近也在关注这方面的问题，ELISA测HCP目前是主流方法，但是该方法也有一些缺点。但是LC-MS测HCP, 成本高，技术本身难度大的多，也更复杂，所以在企业普及，即使是在欧美，我估计也需要相当长的时间。
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qianqin1977[使用道具]
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发表于 2015-8-6 18:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 hustwb 于 2015-8-6 18:10 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

跟一个老师聊天，讲到了FDA要求在临床三期的时候需要自己开发宿主蛋白的检测试剂盒，而试剂盒的开发主要有两种方案，一种是将空细胞按照已定的生产工艺进行发酵和纯化，然后将获得的东西免疫动物制备抗体。还有一种就是将工 ...

这个要求，我目前还没有看到，FDA官方网站有相关文件吗？即使是”FDA要求在临床三期的时候需要自己开发宿主蛋白的检测试剂盒“，企业自己也完全可以外包到CRO公司做，难度并不是太大。特向楼主介绍一篇GEN上的一篇很好的相关文章：Developing Antibodies for Detection of Host Cell Protein Contaminants,
cuturl('http://www.genengnews.com/gen-articles/developing-antibodies-for-detection-of-host-cell-protein-contaminants/5118/?kwrd=hcp')
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