小中大非常感谢,前面战友的帖子,受益匪浅!
但是,我有几个问题想请教一下:
1.如果我是做一个样品在作用因子刺激下,多个基因的表达前后的变化(差不多30-40个不同基因),这样的话,我每个基因都要做标准曲线(如果每个标准曲线5-6个点,每个点有3个重复),这样,是不可能在一个板上进行的,这样怎么消除误差呢?
2.同时,如何能保证所有基因扩增效率都和内参基因一致(2-ΔΔCT法)呢?即使采用Pfaffi法(要求所有目标基因,扩增效率一致(不知道我理解的对不对)),又如何保证所有目标基因扩增效率一致呢?
困惑,希望高人指点!!!