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标题:为什么我的目的条带总是不太亮？？？求助

HOT兔[使用道具]
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发表于 2011-9-2 17:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我P过更短的目的片段，只有87bp，建议你用2%的中空小胶（如果要回收，就用大孔），跑15到20分钟，因为时间长了，目的片段容易弥散掉。还有就是可以增加你PCR的循环数，增加产物的浓度（我用的是35个循环）。
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丁香@@[使用道具]
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发表于 2011-9-2 17:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
137bp, 1%的胶就够了，估计你的染料不足，可电泳后EB浸泡，另外你的酶也许有问题，效率偏低，可选择Takara,rTaq或者exTaq,最好热启动的
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丁香@@[使用道具]
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发表于 2011-9-2 17:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
137bp, 1%的胶就够了，估计你的染料不足，可电泳后EB浸泡，另外你的酶也许有问题，效率偏低，可选择Takara,rTaq或者exTaq,最好热启动的
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小妖儿[使用道具]
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发表于 2011-9-2 17:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
感谢各位哥哥姐姐对小弟的关怀
我通过查找以及和同学对比发现确实是片段长度决定亮度
100bp就是很淡
所以老板那也通过了！！！！
谢谢大家！！！！
谢谢!
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