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标题:【讨论帖】看图说细胞-状态好坏鉴别

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活化后,T细胞会伸出许许多多“手臂”样伪足,抓住抗原性物质,再使出十八般武艺,用各种各样方法消灭“非己”势力。
(这两张图是我从“免疫学信息网”上搜来的。)
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gmt[使用道具]
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看过之后感受颇多,谢谢你的贡献,太无私了!
我正在养晶状体上皮细胞,看过图后大致知道自己的细胞养成何种档次了!
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喵咪[使用道具]
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我养的肿瘤细胞YAC-1经常遇到奇怪的现象,当我换液1天内细胞都很好,但是两天就开始有楼主那张too bad照片上的细胞了,细胞缩小,能看到原先细胞膜的形状,六小时后就基本都是小细胞了,不知道是什么问题,已经反复很多次了...搞的我心力交瘁...
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QUOTE:
原帖由 喵咪 于 2015-8-10 15:57 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
我养的肿瘤细胞YAC-1经常遇到奇怪的现象,当我换液1天内细胞都很好,但是两天就开始有楼主那张too bad照片上的细胞了,细胞缩小,能看到原先细胞膜的形状,六小时后就基本都是小细胞了,不知道是什么问题,已经反复很多次了...搞的 ...

不要紧张,可能你的细胞增殖很快(肿瘤细胞大凡都有这样的特性,看看源一兄发的帖子,就会知道什么叫“疯长”了)。
我们的细胞也是肿瘤细胞系,1640/10%NBS, 至少一天换一次(一开始,按别人的建议两天换一次,结果损失惨重)。
建议你,
1. 先摸摸在你们实验室,YAC-1细胞的倍增时间(最简单的方法是:分时间点,作细胞计数)。
2. 尝试缩短换液时间,注意不要等到培养液有“浑浊感”才换,那时细胞浓度太大,代谢废物累积太多,很不利于细胞生长。
3. 比较不同浓度,不同换液时间间隔,哪种细胞状态最好。
耐心摸索吧,但愿你的细胞能快快好起来。
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同意楼上的意见。
我只养过悬浮细胞,体会是勤换液,控制细胞量(宁少勿多)。
如果细胞状态总是调不好,索性重新复苏吧。
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雪花子[使用道具]
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很好,我培养的是BHK-21细胞,生长状况不好,昨天培养基的颜色很红,今天重新配了培养基,正在观察之中,
主要还是消化的时间难以控制
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雪花子[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 喵咪 于 2015-8-10 15:57 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
我养的肿瘤细胞YAC-1经常遇到奇怪的现象,当我换液1天内细胞都很好,但是两天就开始有楼主那张too bad照片上的细胞了,细胞缩小,能看到原先细胞膜的形状,六小时后就基本都是小细胞了,不知道是什么问题,已经反复很多次了...搞的 ...

偶也在养YAC-1,说些体会吧
刚刚复苏时很好,但是过2-3天就急转直下乐,细胞开始变小,破裂,状态非常的差
但是这个时候千万不要放弃,一是可以重新复苏细胞,二是坚持換液,注意要清洗细胞,还有必要的话把培养瓶换掉,因为瓶壁上已经有大量的细胞碎片和代谢物,这些一般对细胞生长不利的
另外就是细胞浓度不要太低,因为细胞,尤其是一些肿瘤细胞具有浓度依赖性,越是浓度低它越发不爱生长,偶是通过一个现象发现的,就是在培養液里有些小纤维时,细胞附着在纤维旁边生长的很好,越多越好,反而只有单个细胞的地方就越是不长。
看到自己挽救乐的细胞真的是HAPPY,祝你好运。
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dhpbj[使用道具]
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这是状态比较好的YAC-1


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2015-8-10 16:04
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dhpbj[使用道具]
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这个是比较差的,可以看到壁上有黑色的细胞碎片
细胞大小也发生变化
有些细胞已经破碎
这时候离心,洗涤,耐心养,还是可以挽救的。


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abc816[使用道具]
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看了你和各位战友的帖子真是收益非浅,对于培养悬浮细胞的初学者非常有用,建议可将标题改为“悬浮细胞培养经验交流专题”
最近在培养THP-1细胞(单核细胞株),因是新手目前细胞状态仍让我担心。刚开始从细胞库拿回时,细胞状态还行,回来传代1天后,就有不少细胞变小皱缩,镜下看细胞大小不一很不均匀,高倍镜下看细胞内有许多成团的小颗粒,核颜色深。已快半月下来,镜下看虽仍有好多活细胞,但数量离传代的标准还不够,培养液的颜色几天也没变黄。细胞这样半死半活的真让我着急(买细胞花了我近1千)。今天才看见上面的帖子,希望能救回自己的细胞。
也请有培养THP-1经验的兄弟多提供宝贵经验。
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