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标题:【讨论帖】看图说细胞-状态好坏鉴别

鸽子不哭[使用道具]
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不知你是否用PERCOLL之类分的,如果是,吸出中间一层后,离心转速稍大一些,时间稍长些(3000RPM,15MIN),离心后后不要直接倾倒,用吸管自上至下吸去1/2或2/3,振匀再补满PBS再离一次。你试试看吧
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dreaming[使用道具]
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有境界,向你致敬。请教一下:用96孔板培养悬浮细胞必须用U形底的吗?平底板为什么不可以?
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yyaxw84[使用道具]
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相关疾病:
先天性卵巢发育不全综合征
神经元培养HEPES在1L培养基中加入3.745g,谷氨酰氨是330mg/L,可以用三蒸水或DMEM配置。用时用滤器滤一下即可。
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sistis[使用道具]
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各位前辈好!本人现养着U937细胞,用1640+15%血清,可细胞总是在复苏的第3天以后开始出现大片的死亡(复苏后第一次换液时看着还挺好),也没见明显污染,特纳闷。特请高人指点迷津,谢谢!
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sistis[使用道具]
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再请问一个问题:
我的Raji细胞状态有些差异,一个培养瓶里,既有菊花样大克隆,又有3~5个细胞集在一起的小克隆,还有很多衰老变形(伸出小伪足)及死细胞,我现在做的离心换液好象无法改变这种状态。盼赐教!
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txwuyan[使用道具]
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谢谢楼主,让我对细胞的好与不好有了直观 的认识,建议多贴一些细胞培养的照片给大家学习。我是做肝细胞培养的,如果有肝细胞的照片就更好了!
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NBA[使用道具]
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major1091
再请问一个问题:
我的Raji细胞状态有些差异,一个培养瓶里,既有菊花样大克隆,又有3~5个细胞集在一起的小克隆,还有很多衰老变形(伸出小伪足)及死细胞,我现在做的离心换液好象无法改变这种状态。盼赐教!

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Raji细胞是肿瘤母细胞,每一个细胞在适当的条件都可以增殖,一些细胞从大克隆群上掉下来,便会自成一体,“开辟新的王朝”,也就是一个新的小克隆。
我在培养中发现,一个非常大的克隆群,往往很快会出现大片“衰退”,失去立体感,透亮度减低,最终只剩细胞的残影。猜测:超大克隆群内部的细胞难以获得充足的养分,细胞之间的竞争抑制也是一个原因吧。
建议:每次换液吹打几次,防止超大克隆形成。
试试看吧,或许有帮助。
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我觉得那些3~5个细胞成的小团看上去状态要好些,能否收集这部分细胞呢?因为目前这种参次的状态细胞生长缓慢,那种超大克隆也总导致很多死亡细胞。
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NBA[使用道具]
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我的经验也是小克隆好些,但只收集小克隆会损失很大。若你的细胞若长得快,不在乎丢掉一些的话,当然可以。
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sistis[使用道具]
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Raji细胞的培养除了1640里的谷氨酰胺,是否还需加大谷氨酰胺的量,如果需要,这个量又该加多少?另:在哪可以买到这种谷氨酰胺?
谢谢!!
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